临床应用TB介绍.ppt

FASTPlaqueTB 結核分枝桿菌噬菌体生物扩增法 临床应用 夏金雁 FASTPlaqueTBTM - 測試原理 结 果 观 察 阳性 阴性 阳性可见有数量不等的噬菌斑，或许多噬菌斑相互融合成透明状；阴性结果无噬菌斑出现。 敏感度分析 中华结核和呼吸杂志2004年12月VOL27，No12 PhaB法检测结核分枝杆菌的敏感性 结核分枝杆菌标准株和临床株用PhaB法出现阳性结果的最低活菌量见表1。 表1 结核分枝杆菌用PhaB法检测出现阳性结果的最低活菌数 菌株（CMCCB号） 最低噬菌斑数 （PFU） 最低活菌数（CFU） 结核标准株（93009） 1-2 0.8×102 临床株（94020） 1-2 1.3×102 临床株（94026） 1-2 1.8×102 临床株（94194） 7-12 1.6×102 临床株（94138） 3-5 1.5×102 临床株（94019） 4-5 1.6×102 临床株（94173） 4-5 1.3×102 临床株（74010） 1-2 1.6×102 临床株（94143） 2-3 2.0×102 中华结核和呼吸杂志2004年12月VOL27，No12 P801-805 上海市肺科医院 PhaB法检测结核分枝杆菌的敏感性 将H37Rv和耻垢分枝杆菌浓度调整至1个麦氏单位/ ml（相当于2×106条细菌/ ml），做1×10－1~1×10－10稀释，吸取各稀释度菌液1 ml分别与0.1 ml噬菌体（1×109PFU/ ml）37℃作用60min，然后浇板检测，计算噬菌斑数目； 同样的菌液浓度，各吸0.1 ml接种米氏7H9琼脂平板，37℃培养至菌落生长，计算菌落数目。 结果表明，H37Rv和耻垢分枝杆菌均在细菌浓度为200~500条/ ml时即可被PhaB检出。 常见结核杆菌检测方法灵敏度比较 痰涂片(抗酸染色) 大于5000条菌/ML 罗氏培养 大于1000条菌/ML 仪器快培960/3D 大于1000条菌/ML 噬菌体生物扩增法 大于100条菌/ML 不适应？ 长久以往,临床所习惯的模式被打破了。诊断时间大大加快了,24小时就能有结果。 阳性的病人一下子多了不少？ 为什么结核病人越来越多？ 单从技术方面分析:检测方法单一 常规痰涂片(抗酸染色) 大于5000条菌/ML的痰液标本可检出，而低于5000条菌/ML的痰液标本被漏诊 罗氏培养 大于1000条菌/ML的痰液标本可检出，但由于检测时间达2个月，常被作为回顾性技术判断 抗结核试验性治疗导致结核杆菌多重耐药率不断提高，难治性结核病人增多。 不可忽视的实际情况：由于检测灵敏度所限，大量被漏诊的痰中带菌病人没有能够早期及时发现，当然也谈不上早期治疗。 中华结核和呼吸杂志2001年10月VOL24，No10 国内结核杆菌噬菌体裂解试验的特异性分析 资料来源于上海市肺科医院（2001年） 结核分枝杆菌 结果 非结核分枝杆菌 结果 非分枝杆菌 结果 结核分枝杆菌 阳性 瘰疠分枝杆菌 阴性 金黄色葡萄球菌 阴性 牛分枝杆菌 阳性 鸟分枝分枝杆菌 阴性 表皮葡萄球菌