Ezrin蛋白与肿瘤转移.ppt

LOGO Ezrin蛋白与肿瘤转移的关系 项目负责人：罗茜 项目组成员：徐晓萌、刘华旭、刘丹、周瑞泉 指导老师 ：王悦 副教授 2010-04-11 项目实施背景 癌症是全世界人口死亡的重要原因之一 。约80％ 的恶性肿瘤患者死于肿瘤转移。侵袭和转移是恶性肿瘤的主要生物学特征，是肿瘤患者死亡的主要原因。 埃兹蛋白(ezrin)即为近年在肿瘤侵袭和转移研究中的相关蛋白，大量研究表明该蛋白在很多肿瘤组织中都有异常表达，并与促肿瘤转移有关。 项目实施背景 埃兹蛋白 (Ezrin)为膜细胞骨架连接蛋白，是连接细胞膜和细胞骨架之间的ERM(Ezrin—radixin—mesin，埃兹蛋白—根蛋白—膜突蛋白)家族成员之一。常与根蛋白、膜突蛋白共同表达于细胞膜内侧。现在普遍认为它通过与CD44，E．钙黏素(E．cadherin)、整合素等细胞表面分子形成复合体，调节细胞粘附，参与肿瘤细胞信号转导和肿瘤细胞吞噬等机制。 项目实施目的 通过查阅文献，我们发现有关埃兹蛋白与肿瘤转移的关系并不十分明确。埃兹蛋白在不同的细胞中过表达或低表达，对肿瘤转移的影响也是不同的。 我实验小组拟通过研究分析肺癌细胞系中埃兹蛋白（Ezrin）的过度表达与低表达对肿瘤转移活性的影响，探讨埃兹蛋白在肿瘤发生发展中的作用，从而对于肿瘤转移机制有更进一步的认识。 项目实施意义 Ezrin 了解肿瘤侵袭和转移的机制 为临床观察肿瘤患者预后，转移提供参考指标 可能成为肿瘤分子靶向治疗的突破点 实验2组 对照组 RT-PCR技术检测与肿瘤转移相关基因的mRNA水平表达情况 实验1组 Ezrin蛋白高表达的肺癌细胞（PG-LH7） Ezrin蛋白低表达的肺癌细胞（BE1） 统计学分析 正常昆明小鼠 结论 荷瘤小鼠 肿瘤形态学观察检测（形态、大小、重量、腹水形成、HE染色） 实验流程图 实验方法 10只，标准条件下喂养 16只，将BE1注射到种鼠中，引起癌性腹水。抽取腹水稀释后，每只小鼠腹部注射癌瘤液0.2ml。 16只，将PG-LH7注射到种鼠中，引起癌性腹水。抽取腹水稀释后，每只小鼠腹部注射癌瘤液0.2ml。 对照组 实验1组 实验2组 造模及分组 小鼠成活时及死亡后，从新鲜癌旁组织提取mRNA用PCR仪分析，对比3组样品中，已确定的与肿瘤转移有关的基因表达相关的mRNA（如IL-6、MMP-2，4，9、VEGF等）表达差异 小鼠死亡后，予以解剖，取出肿瘤组织，用游标卡尺测量肿瘤组织的直径，用电子天平称量肿瘤重量 Ezrin蛋白与肿瘤转移关系 观察指标 mRNA水平观察 形态学观察 预实验：熟练建立模型，掌握PCR技术 实施实验，观察记录 分析指标 2010.05—2010.06 2010.07—2010.10 2010.11-2011.01 项目实施进度和安排 实验成果总结，撰写论文 2011. 02-2011.04 Ezrin蛋白与肿瘤转移关系 探索Ezrin蛋白与肿瘤转移的相关性 促进？抑制？无关？ 预期成果 发表核心期刊论文1篇 Ezrin蛋白与肿瘤转移关系 经费预算 预算科目 支出项目 金额（元） 实验业务费 学术会议 、版面费、审稿费 200.00 实验材料费 实验动物、药品、 饲料、耗材 3550.00 图书资料费 文献检索、复印费、 图书购买 250.00 合计 4000.00 Ezrin蛋白与肿瘤转移关系 主要参考文献 [1] Yu Y，Khan J，Khanna C，et a1．Expression profiling identifies thecy—To skeletal organizer Ezrin and the developmental homeoproteinSix一1 askey metastatic regulators[J]．Nat Med，2004，10 (2)：175 [2] 谢丽，杨俊玲，张培莲，细胞骨架蛋白Ezrin的生物学特性，现代肿瘤医学2009年1月第17卷第1期 [3] Martin TA ，Harrison G，Manse lRF，et a1．The role of the CD44-Ezrin complex in cancer metastasis[J]．Crit Rev Oncol Hematol，2003，46(2)：165． [4] 史荣亮，李建芳，翟颖，等．肿瘤转移相关基因Ezrin在胃癌中的表达及意义[J]．中华胃肠外科杂志，2006，9(5)：433--435． [5]Hushes SC，FehonRG．Undemanding ERM proteins-the awe·Borne power of genetics finally br