人外周血淋巴细胞分离液说明书 天津市灏洋生物制品科技有限责任公司.pdf

人外周血淋巴细胞分离液说明书 【产品名称】 通用名称：人外周血淋巴细胞分离液 商用名称：人外周血淋巴细胞分离液 英文名称： Lymphocyte Separation Medium 【包装规格】 200ml 【预期用途】 适用于从人抗凝血液中分离单个核细胞（主要为淋巴细胞），无菌条件下所 分离的细胞可用于免疫学检测。 【检验原理】 外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞，其体积、形态和密度 与其他细胞不同，红细胞和白细胞等细胞密度较大，为 1.090 g/ml 左右，而淋 巴细胞和单核细胞密度为1.075～1.090 g/ml，血小板为1.030～1.035 g/ml。 为此，本公司将葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡甲胺按一定比例混合，调整比重、 pH 值和渗透压，经过澄清及除菌过滤后制成一种密度在 1.077g/ml 并且近于等 渗的溶液（分层液），经过密度梯度离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布， 从而将各种血细胞加以分离。 【检验方法】 取新鲜抗凝血1ml，与注射用生理盐水1:1 混匀后，小心加于2ml 的细胞分 离液之液面上，以400g 离心(半径 15cm 水平转子)20 分钟，此时离心管中由上 至下细胞分四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞。第三层为透 明分离液层。第四层为红细胞层。收集第二层细胞放入含注射用生理盐水 4-5 毫升的试管中，充分混匀后， 400g，离心20 分钟。沉淀经反复洗2 次即得所需 细胞。(此方法效果较好，推荐使用) 400g，离心 20 分钟 【主要组成成份】 本品为带有乳光或微乳光的注射水溶液，主要组成成份是葡聚糖（右旋糖酐） 与泛影酸葡甲胺。 【储存条件及有效期】 18-25℃避光保存，有效期2 年。启封后置4℃保存，有效期1 周。本品为 真空包装，未启封前置于10℃ 以下易出现白色结晶，影响分离效果。 【适用仪器】 半径15cm 水平转子离心机。 【样本要求】 本分离液要求血液为新鲜的抗凝血，血液收集时应无菌操作且在储存、处理 和运输过程中避免冷冻和冷藏。 【参考值（参考范围）】 收集淋巴细胞的纯度大于80%。 【检验结果的解释】 由于各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季的差异，可能 影响分离效果，用户可以调节离心转数和离心的时间，摸索最佳的分离条件（具 体分离条件各实验室自定）。 【检验方法的局限性】 本试验要求，在正常大气压下，样本、分离液及分离环境温度为20℃ 2℃。 ± 本分离液在低温时呈较高密度，在高温时呈较低密度。 【产品性能指标】 密度 1.077 0.001g/ml ± pH 7.0-7.5 渗透压 280-340mOsmol/kg 内毒素 ≤0.5EU/ml 无菌 直接接种培养14 天后培养基澄清 澄明度及不溶性颗粒物 每50ml溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以 下，含25 μm 以上的不溶性微粒5 粒以下 【注意事项】 1. 启封后应置4℃保存，避免微生物的污染。 2. 细胞分离液从冰箱取出后，不可立即使用，需待溶液温度升至室温时，摇匀 后使用。 3. 整个分离过程中，温度应控制在 20℃ 2℃且在无菌环境下进行，避免微生 ± 物的污染，否则会影响分离质量。 【生产企业】 企业名称：天津市灏洋生物制品科技有限责任公司 地址：天津市南开区白堤路236 号201-216