土霉素的化学结构作用机理.ppt

土霉素的简介 土霉素又称地霉素、氧四环素，为淡黄色片或糖衣片，属于四环素类，可用于治疗立克次体病，包括流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、洛矶山热、恙虫病和Q热，支原体属感染和衣原体属感染等疾病。土霉素生产工艺简单、生产成本较低，可作为生产其它新型抗生素的原料。 土霉素的化学结构 作用机理 土霉素为广谱抑菌剂，能特异性地与细菌核糖体30S亚基的A位置结合，抑制肽链的增长和影响细菌蛋白质的合成，能抑制动物肠道内的有害微生物，激活大肠中有利于营养物质合成的微生物。可使动物肠壁变薄，更有利于营养物质的吸收和利用，从而提高肠道吸收效率。 土霉素的应用 土霉素价格低廉，可以作为饲料添加剂用于养殖业，可以改善饲料转化效率，促进畜禽生长，提高畜禽抗疾病能力。对多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌大肠杆菌，均有抗菌作用。 土霉素的生产 土霉素通常由龟裂链丝菌发酵得到，目前国内提取工艺一般以草酸(或部分盐酸替代草酸)作酸化剂调节发酵液pH值，利用黄血盐钠和硫酸锌作净化剂生成普鲁士蓝沉淀协同去除Fe3+及高分子杂质，再经122-2树脂脱色，调节pH至4.6，干燥得到土霉素成品。 它的生产流程如下所示： 生产流程的阐述 菌种： 龟裂链丝菌属放线菌，孢子丝初旋至螺旋形。孢子长圆形至柱形，表面光滑。在蔗糖硝酸盐琼脂气丝白色，斑片状，在边缘。基丝薄，乳脂色，后较丰厚，红褐色至橙色。可溶色素略微黄色。 砂土管保藏法：将干燥砂粒与细土混合后灭菌制成砂土管，然后接种保藏。若把砂土管放在低温或抽气后密封，效果更佳。此法适用于产孢子及芽孢菌种的保藏。保藏期1～10年。 孢子制备： 生产用的孢子需经过纯种和生产能力的检验，符合规定的才能用来制备种子。保藏在砂土管或冷冻干燥管仲的菌种经无菌手续接入又麸皮、琼脂和水组成的斜面培养基中，在36.5-36.8℃、50%相对湿度的条件下培养4-5天，挑选菌落正常的孢子作为种子。 种子培养： 种子制备是指孢子接入种子罐后，在罐中繁殖成大量菌丝的过程，其目的是使孢子发芽、繁殖和获得足够数量的菌丝，以便接种到发酵罐当中去。种子制备所使用的培养基及其它工艺条件，都要有利于孢子发芽和菌丝繁殖。种子培养基的成分基本与发酵培养基近似，培养30℃、30小时左右培养液趋于浓厚并转为黄色。pH一般在6.0-6.4时可以移入下一级罐。 发酵培养基： 土霉素的发酵培养基由碳源、氮源、无机盐及金属离子、添加前体、消泡剂五部分组成。 碳源：可以用葡萄糖、饴糖、籼米粉、玉米粉及淀粉的解酶液作为碳源。本设计采用淀粉作为碳源，发酵相对容易控制。 氮源：有机氮源为黄豆粉饼、花生粉饼、蛋白胨、酵母粉、玉米浆等，通常使用黄豆粉饼。无机氮如氨水、硫酸铵等可适量使用。 消泡剂：采用植物油消沫，一方面作为消泡剂，另一方面还可以起到碳源作用。 无机盐：磷酸盐浓度对放线菌的生长和抗生素的合成影响很大，故应该严格控制磷酸盐的浓度。 发酵条件的控制： 发酵开始前，有关设备和培养基必须先经过灭菌，后接入种子。接种量一般为20%。发酵周期一般为194h。发酵全程30-31℃分段培养，通气量为2.0V/(V·min)。当接种后发酵PH低于6.4时开始通氨培养20-40h，每四小时补一次，每次10~15L，控氨水平45mg/100ml以上。根据发酵残糖值补入总糖，一般在100小时前残糖控制4.0~5.0%，100-150h控制3.5-4.0%，150至放罐前6h控制在3.0%。在整个过程中，需要不断通气和搅拌，维持一定的罐温和罐压，并隔一段时间取样进行生化分析和无菌试验，观察代谢变化、抗生素产生情况和有无杂菌污染。 发酵液的预处理： 土霉素因能和钙、镁等金属离子，某些季铵盐、碱等形成复合物而沉淀，在发酵过程中，这些复合物聚集在菌丝中，而在液体中浓度不高，因此，应对发酵液进行酸化的预处理使之释放出来，以保证沉淀的收率和质量。草酸作为酸化剂，其去钙较完全，析出的草酸钙还能促进蛋白质的凝结，提高滤液质量，草酸属于弱酸，比盐酸、硫酸等对设备的腐蚀性小。 因此生产中通常采用草酸作为酸化剂，其去钙较完全，析出的草酸钙还能促进蛋白质凝结，提高滤液质量。并且促使差向土霉素等异构物产生。因此在添加时必须温度必须在15℃以下。且尽量缩短操作时间。通常考虑土霉素稳定性和成品质量及成本的前提下，PH控制在1.6-1.9。 发酵液的纯化： 发酵液中同时存在着许多有机和无机的杂质，使用的草酸可以与钙离子、镁离子等形成沉淀，同时作为酸化剂调节PH；净化剂为黄血盐、硫酸锌可加入黄血盐进而硫酸锌协同作用除去蛋白质，同时除去铁离子(黄血盐和铁离子生成普鲁士蓝沉淀)，并加入硼砂，