簟7卷第 3靴.PDFVIP

维普资讯 j7牛一；(卜{ 8 ◇ 簟 7卷第 3靴 中 自 情 毒 拳 0I．T No．3 199啤 9月 VIROLOGTCA SINICA SaP．1992 兔出血症病毒四个分离株的病毒 多肽和血清学关系研究 朱 文 (中国科学院武汉寤毒研究所，武汉 43~D7t) 提 要 使 用 PEG—DS两相 系统和超离心提纯的兔出血症病毒 (RHDV )四个分 离椿病毒 ， 再经 Sepharog,~4B拄层析进一步提纯霜，得到较 纯的病毒粒子，回收率可运70哺以上 。 照用常规双 向免痤扩散试验，交叉血凝抑翩试验和酶联免疫嗳附试验 (ELISA)对四个 不 同地 医分 离株 问的血清学关系进行 了比较研究。结果表 明实验 中前 四个分 离 袜病毒均 雇同一血清型。SDS结果表 阴，这 四个分离 株病毒 均含有四 条多脒 ， 分子置为 28--66KD。各株病毒多肚 的分子量和各多肽在病毒粒子总蛋 白中所 占比例略有差异。 因 此四十分离株的 RHDV在蛋白笫构上可能存在地 区差异。 关键诃：兔出血症宿毒 瞳芏差墨 ．生要兰坠 兔出血症病毒 自1984年发现 以来，国内许多科学工作者针对奉地区发生的兔出血症 分离橡进行了形态结构、理化性质方面的研究 “ 。罗经”、黄文林㈣、孙富栋 等曾 对国内～些地区RHDV分离株之间的血清学关系进行了研究，证明这 些地区的分离 株 同属一血清型。对 RHDV的结构多肽 的研究报道为数不多，且结果也各有差异 ”。 本文采用几种不同的血清学试验方法，对我国四个地逸 分离株的RHDV病毒进 行了血 清学关系研究，同对对四株病毒的蛋 自多肽进行了分析。这将为今后生产亚单位疫苗和 诊断药盒的研制提供理论依据， 为有效地 防治该病 的流行和RHDV的分子病毒学基础 ． 研究具有重要意义。 材 料 与 方 法 一 、 瘤毒 无锡 A2R～3抹 (霄5) 无锡兽医站提供。 山东1-7-2株 (SD )，从山东兔出血症病死兔肝 中分离。 贵州棒 (GZ)从贵州兔 出血症病 死兔肝中分离 本文于1991年 8日1q月收到，l2月-~OEI惨 回。 此谭题为国家 自然科学甚盘资助项 目之一。 幸 现在成邪四川大等生物工程系工怍。 维普资讯 第3期 朱文等 兔由血症翥毒四十分离株的痛毒多肽和血清学关系研究 33S 湖北滨镧株 (BH )为本 组在武汉分离。 以上各株病毒均在兔体内传代两次后使用。 = 、痈毒抗器的制备 四株 RHDV均采用两相法和 Sephsrose4B柱层析法提取和纯化。 扁兔肝组 织经匀浆，冻融，lO000r／m 30 离‘心后，上请 液加入 6．5嘶 (wtv )PEG和0．4舶 (wtv)硫酸葡聚糖 (DS500000)溶解后 4℃过夜 ，沉淀溶于 0．1mol／LPBS(pH7．4)中． 10000r／m离心30分钟。上滑液苒经40000~／m离心 90分钟 ，和以25咖蔗糖溶液垫底 40000r／m离 心90分钟 ，沉淀溶于0．