细菌的培养及鉴定幻灯片.pptVIP

概念 细菌培养：细菌培养是一种用人工方法使细菌生长繁殖的技术。用人工方法将采集的标本接种于培养基上，使其生长繁殖。对培养出来的细菌进一步鉴定分型及药物敏感试验，为临床的治疗及抗生素选择提供帮助。 分离培养：将目标菌培养并从杂菌中分离出来的过程. 纯培养：将单一的细菌（也可以是细胞原虫等）进行增殖,不含其他杂菌 标本转运的原则 所有标本必须立即送交实验室，最好不要超过2小时，如标本处理不得不延迟，应在合适的条件下储存，但不超过24小时。 对环境敏感的微生物包括志贺氏菌（应立即处理）、淋球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌（对低温敏感）。脑脊液、生殖器、眼或内耳标本不要冷冻。 标本的拒绝接收原则 未贴或错贴标签 送检延迟 不正确的转运温度和转运工具 不合适或泄漏的容器 有明显污染的标本 干涸的拭子标本 标本量不足 同一天内同一个检测条件的重复标本（血培养除外） 问题标本的处理 与送检医生或护士联系。对非损伤方法取得的标本，再送新标本。对经损伤程序取得的标本，和临床联系后可以处理，但要在申请单上注明问题。 特殊情况下，即使标本质量有损害，也必须处理。 疑难病症 罕见病例 传染性疾病的会诊 血液细菌培养 临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血流感染的患者，需做血液细菌培养以明确病原。 及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，才能正确实施有效地抗菌治疗，从而有助于提高治愈率和降低医疗费用。 采血时机 在出现临床症状后应尽快抽血作培养，最好在发热初期和高峰或寒战时。 原则上应选择在抗菌药物应用之前，对已应用药物而病情不允许停药的患者也应在下一次用药前采血。 采血部位 通常采血部位为肘静脉。 疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。 多次采血时, 应在不同部位进行。 不要从血管插管内采血。 切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取 血标本。 采血方法 采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养瓶前，应更换针头或过火消毒针头。 血培养瓶口也要消毒，并待酒精挥发后（建议用酒精灯烧灼瓶口）再注入血样, 。 采血量 每次采血量成人5～10ml，婴幼儿1～2ml，培养基与血液之比以10：1为宜，以稀释血液中的抗生素。 每增加1ml血量平均提高阳性率3.2%。 临床常见问题 痰涂片与痰培养结果不一致？ 培养和涂片选择的痰液不同；标本采集时间过长，部分苛养菌死亡； 选择药敏结果敏感的药物，临床治疗无效？ 体外药敏试验只能预测体内治疗效果，并不等同；一般来说，耐药=治疗无效，敏感≠治疗有效 今天培养结果与前天结果不一样？ 1）取材是否规范？ 2）痰标本有时候选择优势菌做，可能结果 不一样 3）抗生素的使用 鉴定结果为四联球菌、革兰阳性杆菌，为何没有药敏结果？ 1）四联球菌为微球菌，一般不引起人体致病，考虑为污染 2）革兰阳性杆菌目前没有参照标准，故暂不做药敏试验，若需要治疗参考阳性球菌用药 B群链球菌——寄生在产妇生殖道。孕产妇脓毒血症和新生儿脑膜炎的重要原因 支原体、衣原体 检测结果为找到抗酸杆菌，临床已经排除了结核 抗酸杆菌包括结核与非结核分枝杆菌，抗酸杆菌阳性不一定就是结核。 谢谢大家！ efore we begin this discussion of cell walls let me remind you that there are two basic types of bacterial cell wall structures that have been studied in detail. Gram positive (G+) and Gram negative (G-). Bacterial cells look very different following staining with the Gram stain. G+ cells are Purple and G- cells are red. 紫色（G＋） 革兰氏染色步骤示意图 革兰染色 甲菌 乙 菌 初染 结晶紫 媒染 碘液 脱色 乙醇 复染 稀释复红 紫色（G＋） 红色（G-） 革兰染色步骤示意图 【结果】 细菌被染成紫色者，称为革兰阳性菌； 而细菌染成红色者，称为革兰阴性菌； 阳性菌——紫色（G+b) 阴性菌——红色（G-b) G+ 球菌 显微镜下的杆菌 G-杆菌 Figure 2 - Gram stain of Gram - E. coli cells 痰标本涂片染色低倍镜下分类 分级 白细胞（个） 上皮细胞（个） A 25 10