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大肠菌群的测定论文 目录 1 普通光学显微镜的使用 2 微生物大小的测定 3 微生物直接计数法 4 细菌的简单染色和革兰氏染色法 5 常用玻璃器皿的清洗及包扎 6 牛肉膏蛋白胨培养基的制备 7灭菌 8 微生物溶液的十倍稀释法 9微生物平板菌落计数法 10 微生物的分离、接种和培养 大型实验： 水中细菌总数和大肠菌群的检测 厌氧菌的分离、培养及鉴定第一节 普通光学显微镜的使用 一．实验器材 普通光学显微镜，切片标本，香柏油，二甲苯，擦镜纸。 二．实验步骤 图？ 显微镜的结构 1目镜 2镜筒 3.物镜转换器 4.物镜 5.通光孔 6.聚光器 7.光圈 8.反光镜 9.粗调节器?? 10.细调节器 11.镜臂 12.推进器 13.载物台 14.倾斜关节?? 15.镜柱?? 16.镜座?? 17. 照明装置??? 18.粗调限位环凸柄 (一)低倍镜的使用1. 把显微镜放在桌面的左侧，镜臂对向胸前，坐下进行操作。用手转动粗调螺旋，使镜筒上升，然后转动物镜转换器，使低倍镜对准镜台中央圆孔（当转动到听见“咔”声响，或同时亦感到有阻力时立即停止转动，说明物镜已与镜筒成一直线）。 2. 对光：拨动聚光镜底部圆环的小柄，使光栏完全打开。旋转聚光镜升降螺旋，使聚光镜上升到和镜台相平。用左眼（两个眼睛都要睁开）在目镜上观察，同时用手调整反光镜，对好光源。要求视野达到完全均匀明亮。 3. 放置玻片标本：取玻片标本放在镜台上，有盖玻片的一面朝上。玻片两端用移动器夹住，然后转动螺旋，使玻片上要观察的标本对准镜中央圆孔。注意，镜台上的刻度可以标示玻片的坐标位置。 4. 调节物距：转动粗调螺旋，使低倍镜距玻片标本0.5mm左右。注意：必须从显微镜侧面观察物镜与玻片的距离。切勿用眼在目镜上观察的同时转动粗调螺旋，以防镜头碰撞玻片造成损坏。用左眼从目镜上观察，用手慢慢转动粗调螺旋下降镜台，当视野中出现物像时，再调节细调螺旋，直至视野中出现清晰的物像（许多椭圆形的红细胞）为止。如果物像不在视野中央，可稍微移动玻片位置（注意：移动玻片的方向与观察物像移动的方向恰好是相反的）。 (二)高倍镜的使用 1. 一定要先在低倍镜下找到要观察的标本物像后，并把要放大的部分移至视野正中，同时调节到最清晰程度，才能进行高倍镜的观察。 2. 转动物镜转换器，（40×）使高倍镜转到镜台中央圆孔处。转换高倍镜时速度要慢，要细心，并从侧面进行观察（防止高倍镜碰撞玻片）。如果高倍镜碰到玻片，说明低倍镜的物距没有调节好，应重新进行操作。 3. 调节物距：转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察。这时物像往往不清楚、或者要观察的部分不在视野当中，可用细调螺旋慢慢向上或向下转动（切勿用粗调螺旋）即能清楚看到物像。一般只需转动半圈或一圈就能达到要求。(三)油镜的使用 1. 首先在高倍镜下找到所要观察的标本后，把所要观察的部分移至视野中央。 2. 转动物镜转换器，移开高倍镜，（40×）（100×）在标本上所要观察的位置加一滴镜油（香柏油）。 3. 转动物镜转换器，转换油镜，使之对准镜台中央圆孔处，4. 转换好油镜后，用左眼在目镜上观察。物像如不清楚，可用细调螺旋慢慢向上或向下转动，如仍看不清标本，需重新用低倍镜、高倍镜观察，然后再转换油镜。 使用显微镜注意事项 1. 持镜时要一手紧握镜臂，一手托住镜座，绝不能一把提起显微镜便走，以防目镜从镜筒滑出或反光镜脱落。 2. 轻拿轻放，不要把显微镜放在实验台边缘，防止碰翻落地。 3. 显微镜光学系统部件要用清洁的擦镜纸轻轻揩擦，切勿口吹、手抹或用粗布揩擦。 4. 使用时先用低倍镜调整光线。观察活体标本或染色较浅的标本时，要适当关小可变光栏便视野变暗，方能看得清楚。 5. 放置玻片标本时要对准镜台孔正中央，并且不能反放玻片，如标本玻片反放时高倍镜下看不到物像，并容易压坏玻片或物镜。 6. 观察时要双目睁开，切勿闭上一只眼睛。左眼观察视野，右眼用以绘图。低倍镜用粗调螺旋调节物距，高倍镜要用细调螺旋，粗、细调节螺旋都不能单方向过度地旋转。单向上升粗调螺旋会压碎镜片和损坏物镜。 7. 不要随便取出目镜，以防尘土落人物镜上。也不要任意拆卸任何零件，以防损坏。 8. 使用完毕后，转动粗调螺旋使镜台下降，取下玻片，转动物镜转换器，使物镜离开聚光孔。再上升镜台使物镜接近镜台（不要对着镜台孔）。然后以右手握镜臂，左手托镜座轻轻放人镜箱中。 9. 每次使用显微镜之前，先按显微镜登记卡片逐项检查显微镜各部分有无损坏。如发现损坏，应及时向教师报告。使用之后，认真填写显微镜使用登记卡片。 用同样的方法换成高倍镜和油镜进行校正，分别测出在高倍镜和油镜下，两重合线之间两尺分别所占的格数。 观察时光线不宜过强，否则难以找到镜台测微尺的刻度；换高倍镜和油镜校正时，务必十分细心，防止接物镜压坏镜台