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第四章 核 酸 化 学 学习指导 本章重点介绍核酸的化学组成,DNA和RNA的结构及有关的物理化学性质和生物学功能。要求同学们掌握: (1) 核酸和核苷酸的基本知识 (2)DNA和RNA的一级结构与功能 (3)掌握 核酸的理化性质,如紫外吸收特性、变性、复性和分子杂交等性质及定量测定等技术原理、方法和应用。 第一节 核酸的化学组成 一、核酸的分类 二、核酸的化学组成 一、核酸的分类 核酸包括: 核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核(DNA)两大类。 RNA和DNA都是以单核苷酸为基本单位所组成的多核苷酸。 RNA主要参与遗传信息的表达,而DNA则是遗传信息的载体。 DNA是遗传物质, RNA也可作为遗传物质。 RNA病毒 病毒颗粒(viron):由病毒RNA基 因组和包被在外的蛋白质外壳组成. 病毒的生存方式:病毒编码包装基因 组所需的蛋白,以及一些在感染循环 中复制病毒所需的蛋白质。其他蛋白 质由宿主提供。因此病毒不能独立生 存。 二、核酸的化学组成 组成核酸的元素有C、H、O、N、P等 (二)核酸的结构组成 1. 碱 基 核苷酸中的碱基均为含氮杂环化合物,它们分别属于嘌呤衍生物和嘧啶衍生物。 五种碱基 稀有碱基 碱基的紫外吸收 碱基的表示:用单字母表示 (1)嘌呤碱 (2)嘧啶碱 (3)稀有碱基 稀有碱基(或修饰碱基),是在核酸合成以后由常见嘌呤碱或嘧啶碱在不同部位进行甲基化或其它的化学基团酶促修饰衍生而成的,一般在核酸中的含量稀少,在各种类型核酸中的分布也不均一。 DNA中的修饰碱基如5-甲基胞嘧啶(m5C),5-羟甲基胞嘧啶(hm5C);5,6-二氢尿嘧啶(DHU)等。 RNA中以tRNA含修饰碱基最多,如1-甲基腺嘌呤(m1A),7一甲基鸟嘌呤(m7G)) 常见的几种稀有碱基 (4) 碱基的紫外吸收(性质) 嘌呤和嘧啶环中含有共轭双键,对260nm左右波长的紫外光有较强的吸收。碱基的这一特性常被用来对碱基、核苷、核苷酸和核酸进行定性和定量分析。 2. 核 糖 核酸中的戊糖有核糖和脱氧核糖(2位的羟基被氢取代)两种,分别存在于核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸中。为了与碱基标号相区别,通常将戊糖的C原子编号都加上“′ ”。 3. 核苷 核苷是由戊糖与含氮碱基经脱水缩合而生成的化合物。 大多数情况下,核苷是由核糖或脱氧核糖的C1’ β-羟基与嘧啶碱N1或嘌呤碱N9进行缩合,生成的化学键称为 糖苷键。 所以有四种核糖核苷和四种脱氧核糖核苷 用单字母表示,在脱氧时加d,如dA。 稀有核苷 RNA 组成: 腺核苷 、 鸟核苷、 尿核苷、 胞核苷 DNA中有:脱氧腺核苷、脱氧胸腺核苷、脱氧鸟核苷、脱氧胞核苷 简称腺苷、脱氧腺苷等 糖与碱基连接的方式: 嘌呤核苷:C1 — N9 嘧啶核苷:C1 — N1 核糖核苷 稀有核苷 “稀有核苷”是由“稀有碱基”所生成的核苷。当然也有例外,例如: (4)核苷酸 核苷中戊糖的羟基与磷酸以磷酸酯键连接而成为核苷酸,包括核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸两大类。 戊糖有2′、3′、5′位自由-OH,因此可以形成2′、3′、5′-核苷酸, 生物体内的核苷酸大多数是5′-核苷酸( 5′常被省略 ) 核苷酸在5′位进一步磷酸化即生成二磷酸核苷和三磷酸核苷,表示为NMP、NDP、NTP,脱氧时加“d”,如ATP、dATP。 核苷酸是构成核酸的基本单位,同样分两类: 1. 核糖核苷酸:腺苷酸、鸟苷酸、胞苷酸、尿苷酸 代号: AMP 、GMP 、CMP 、UMP 依次为: ADP、 GDP、 CDP 、 UDP ATP、 GTP、 CTP、 UTP 2. 脱氧核苷酸:脱氧腺苷酸、脱氧鸟苷酸、脱氧胞苷酸、脱氧胸苷酸 代号: dAMP 、dGMP、 dCMP 、 dTMP dADP 、 dGDP、 dCDP 、 dTDP dATP 、 dGTP、 dCTP、 dTTP 注意:人们常常把碱基的代号A、U、G、C、T来表
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