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- 2018-05-13 发布于江苏
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课题3血红蛋白的提取和分离
蛋白质分离的原理和方法 [自读教材·夯基础]
1.蛋白质分离的理论依据
2.分离的方法
(1)凝胶色谱法:
概念:也称作分配色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
凝胶
原理:相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢,通过凝胶的时间较长;相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,通过凝胶的时间较短。
(2)电泳:
概念:指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
原理:在一定的pH下,多肽、核酸等生物大分子的可解离基团会带上正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
影响电泳速率的因素:
方法:常用的电泳方法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3.缓冲溶液
(1)作用:在一定范围内,抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变。
(2)配制:由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成,通过调节缓冲剂的使用比例就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。
[跟随名师·解疑难]
1.凝胶色谱法
(1)凝胶:是一些微小多孔的球体,内含许多贯穿的通道,具有多孔的凝胶,又称为分子筛。
(2)原理:
项目 相对分子质量大 相对分子质量小 直径大小 大于凝胶颗粒空隙直径,被排阻在外面 小于凝胶颗粒空隙直径,可以进入颗粒内部 运动方式 垂直向
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