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- 2018-05-13 发布于江苏
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第5课时 微生物的实验室培养(二)[学习导航] 1.通过阅读教材P16~17“(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基”,掌握配制培养基的步骤和倒平板操作的过程。2.结合教材P18~19“(二)纯化大肠杆菌”,理解并掌握利用平板划线法和稀释涂布平板法来纯化微生物的方法。[重难点击] 1.掌握制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法。2.学会用平板划线法和稀释涂布平板法纯化微生物。一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基牛肉膏蛋白胨固体培养基是细菌培养中常用的一种培养基,大肠杆菌的纯化就是用的该培养基。1.牛肉膏蛋白胨培养基的成分及各成分提供的营养培养基组分提供的主要营养物质牛肉膏5.0g碳源、氮源、磷酸盐和维生素蛋白胨10.0g碳源、氮源和维生素NaCl5.0g无机盐蒸馏水定容至1000mL氢元素、氧元素2.制备步骤(1)培养基的配制计算:根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例,计算配制100mL培养基时各成分的用量↓称量↓溶化↓调节pH:1 moL的NaOH、pH试纸,将pH调为7.4 ~7.6↓分装:趁热分装到洁净锥形瓶中↓加棉塞:用棉花不用脱脂棉,脱脂棉吸水↓包扎:外包牛皮纸,且挂标签(2)灭菌(3)倒平板①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。②右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰。③用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培
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