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- 2018-05-13 发布于江苏
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第课时 基因工程与克隆技术
考点一 基因工程
1.(填空)
2.基因工程的基本操作程序(填空)
(1)目的基因的获取途径:
方法 具体操作 直接分离 从自然界已有的物种中分离,如从基因文库中获取 人工合成 化学合成 已知核苷酸序列的较小基因,直接利用DNA合成仪用化学方法合成,不需要模板 逆转录法 以mRNA为模板,在逆转录酶作用下人工合成 PCR技术扩增 原理:DNA复制;条件:模板DNA、引物、脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶过程
(2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建:
表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点。
启动子和终止子:启动子是RNA聚合酶结合位点,启动转录;终止子是终止转录的位点。
(3)将目的基因导入受体细胞:
植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞法(用Ca2+处理) 受体细胞 受精卵、体细胞 受精卵 原核细胞
(4)目的基因的检测与鉴定:
导入检测:DNA分子杂交技术(使用DNA探针)。
表达检测
个体生物学水平鉴定:如对转基因作物进行抗虫或抗病等接种实验。
3.蛋白质工程(填空)
(1)启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用(2015·重庆卷,T6D)(×)
(2)携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测(2014·天津卷,T
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