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第一章 基因工程 第一节 基因工程概述 基因工程的诞生和发展和基因工程的工具 学习目标 ⑴简述基因工程的概念含义 ⑵简述基因工程诞生历程 ⑶认同基因工程的诞生和发展离不开理论突破和技术创新 ⑷简述基因工程的原理 ⑸说出DNA重组技术的基本工具及其作用、特点 课前导学 一、基因工程的诞生和发展 1．理论基础 (1)艾弗里：证明了 。 (2)沃森和克里克：阐明了 。 (3)尼伦贝格等破译了 。 2．工具基础 (1)酶： 和 、逆转录酶。(2)载体： 等。 3．发展 (1)1973～1976年为 。 (2)1977～1981年为 。 (3)1982年以后为 。 4．诞生：科恩等将两种不同来源的DNA分子进行 ，并首次实现了在大肠杆菌中的表达，创立了 改造生物的新技术——基因工程。 二、基因工程的概念 方法 在体外通过人工 和 等方法 原理 对生物的基因进行改造和 操作水平 水平 过程 包括基因的 、____________转移及在受体细胞内的 和 等。. 目的 获得人类需要的 。 三、基因工程的工具 1．限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)功能：只能 特定的核苷酸序列，并在合适的反应条件下使每条链特定部位的 之间的 断开，从而切割DNA分子。 (2)作用结果 ①产生黏性末端：通过错位切，在两条链的 部位切割形成。 ②产生平口末端：通过平切，在两条链的 部位切割形成。 2．DNA连接酶——“分子针线” (1)功能：把DNA分子这把“梯子”的扶手 连接起来。 (2)结果：用 限制性核酸内切酶切割质粒和外源DNA分子，并通过 的连接，形成______________分子。 3．载体——运载工具 (1)功能：将 导入受体细胞。 (2)种类：质粒、 以及一些 。 (3)质粒：来自于 细胞中的一种很小的 分子，是最早应用的载体。 质疑探究 1．切断和形成磷酸二酯键的酶分别有哪些？ 2．原核生物中限制酶有何意义？细菌是如何防止自身DNA被限制酶降解？ 3．在基因工程中，为什么要用同一种限制性核酸内切酶（如EcoRⅠ）切割两种DNA分子呢？P12实践中的图示切割后的片段可以连接成几种DNA分子？ 4．从结构上分析为什么不同生物的DNA能够重组？ 5．不同限制酶切割产生的黏性末端一定不同吗？ 6．要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 7．作为载体应具备什么条件？ 8．天然的可以直接用做基因工程载体吗？为什么？4．下图所示是限制酶切割某DNA分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是 A．CTTAAG，切点在C和T之间 B．CTTAAG，切点在G和A之间 C．GAATTC，切点在G和A之间 D．GAATTC，切点在C和T之间 5．在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“运载体”分别是指 A．大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶 B．噬菌体、质粒、DNA连接酶 C．限制性核酸内切酶、RNA连接酶、质粒 D．限制性核酸内切酶、DNA连接酶、质粒 6．作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由是 A．能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因 B．具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件 D．能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选 7．下图为DNA分子的切割和连接过程。 (1)EcoRI是一种 酶，其识别序列是 ，切割位点是 与 之间的 键。切割结果产生的DNA片段末端形式为 。 (2)不同来源DNA片段结合，在这里需要的酶应是 酶，此酶的作用是在 之间形成 键，而起“缝合”作用的。还有一种连接平末端的连接酶是 。 反馈矫正 1．在基因工程中，切割质粒和含有目的基因的DNA片段，需要使用 ( ) A．同种限制性核酸内切酶 B．两种限制性核酸内切酶 C．同种DNA连接酶 D．两种DNA连接酶 2．下列黏性末端中，属于