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第二章 红细胞血型检测技术Chapter 2 Examination of RBC blood groups 第一节 输血前检查 第二节 盐水介质试验技术 第三节 酶处理试验技术 第四节 抗球蛋白试验技术 第五节 聚凝胺介质试验技术 第六节 吸收放散试验 第七节 凝集抑制试验 第八节 抗体效价测定 第九节 其他血清学试验 第十节 基因检测技术 第一节 输血前检查 一、目的和主要程序 二、患者病史及标本处理 三、ABO和Rh定型 四、抗体筛选和鉴定 五、交叉配血试验 六、记录结果及血液登记发放 七、大量输血和紧急输血的发血 一、目的和主要程序 (一)目的： 准确选择用于患者的血液或血液制剂，使输注的血液成分能在患者体内存活并发挥其有效作用。“相容” 一、目的和主要程序 (二)主要程序： 1.了解患者与输血相关的病史和血液标本等的接收、检查、核对及处理； 2.ABO血型系统和RhD抗原定型； 3.红细胞同种抗体筛查和鉴定； 4.交叉配血试验； 5.做好实验记录、血液登记与发放。 二、患者病史及标本处理 (一)病史资料： 尽可能了解、核对患者的有关资料，包括姓名、性别、年龄、种族、临床诊断、药物史、妊娠史，特别是既往输血反应的记录等。 二、患者病史及标本处理 ※(二)标本要求与处理： 1.必须有准确的标签，代表当前的免疫状况； 2.经鉴定和标记，确认来自患者和供者，并与申请单内容核对、确认； 3.要防止患者标本稀释和溶血，血清和血浆均可用于输血前检查，选择合适的检测方法。 二、患者病史及标本处理 ※(二)标本要求与处理： 4.使用血浆，注意排除Fg的干扰； 使用血清，排除补体的干扰。 5.患者血液标本一般不能超过3天， 而近期无输血或妊娠时可例外。 6.每次输完血，患者和供者的标本必须保存于2-8℃至少7天。 二、患者病史及标本处理 ※(二)标本要求与处理： 7.反复输血患者应抽取新的标本做配血试验,避免回忆反应抗体。 8.患者肝素抗凝治疗，则应用硫酸鱼精蛋白中和，使标本凝结。 9.患者使用右旋糖酐、PVP等治疗，应注意洗涤被检红细胞。 三、ABO和Rh定型 (一)ABO定型和定型试验中存在的问题※ 1.ABO血型定型： (1)正定型：用标准抗血清检测红细胞表面抗原。 (2)反定型：用标准血型红细胞检测血清中抗体。 抗体多数为IgM，室温，盐水介质，明显凝集。 二者同时进行，互相验证。 6个月之内的婴儿，只做正定型。新生儿血清中可能存在来自母体的抗体，应注意鉴别？ (一)ABO定型和定型试验中存在的问题 2.ABO血型鉴定存在的问题： (1)常见技术和事务工作错误:正反定型不一致 ①错加标本或试剂→假阳性或假阴性； ②试验器材不清洁→假阳性； ③试剂污染或失效→假阳性或假阴性； ④离心过度或不足→假阳性或假阴性； 2.ABO血型鉴定存在的问题： (1)常见技术和事务工作错误:正反定型不一致 ⑤溶血为阳性反应，误判为阴性； ⑥漏加试剂→假阴性； ⑦结果记录或判断错误→假阳性或假阴性； ⑧细胞与血清比例不当→假阳性或假阴性。 2.ABO血型鉴定存在的问题： (2)患者红细胞或血清本身的问题： 1)血清异常：脐带血中的华通胶或血清高M蛋白引起RBC缗钱状； 2)红细胞致敏：在高蛋白介质中可发生凝集； 3)异常基因型：ABO亚型； 4)近期输血：显示混合外观凝集； 2.ABO血型鉴定存在的问题： (2)患者红细胞或血清本身的问题： 5)嵌合体血型：(异卵双胎),有2种RBC群体，显示混合外观凝集； 6)疾病导致抗原减弱:白血病及MDS,正反定型不一致；Tn或T多凝集 7)红细胞多凝集现象：遗传或获得性异常，如细菌酶作用，几乎与所有人血清发生凝集反应； 2.ABO血型鉴定存在的问题： (2)患者红细胞或血清本身的问题： 8)获得性B：G-菌感染→脱乙酰酶→类B。 见于肠道疾病A1血型患者。 9)特异性血型物质过高：卵巢囊肿。 中和抗A/B血清；处理：多次洗涤红细胞 10)近期内进行大量非同型血浆置换治疗： 供者提供了抗A/B→反定型错误； 2.ABO血型鉴定存在的问题： (2)患者红细胞或血清本身的问题： 11)异常血浆蛋白：白蛋白、球蛋白、Fg； 12)存在意外抗体：ABO以外的不规则抗体； 13)低丙种球蛋白血症：抗体减少，反定型 不凝集； 14)药物因素:右旋糖酐及静脉注射造影剂使 RBC聚集； 2.ABO血型鉴定存在的问题： (2)患者红细胞或血清本身的问题： 15)年龄因素：未产生抗体婴儿、获得母亲抗体的婴儿、抗体水平低的老年人。 16)防腐剂因素：产生抗体。 17)单克隆定型试剂与人源多克隆血型血清在判断和分析弱抗原