生物化学试验教学大纲 四川农业大学课程.docVIP

四川农业大学本科课程教学大纲 一、课程名称：生物化学实验 总学时：36学时 二、课程的性质、地位和和任务 生物化学是一门实践性很强的课程，按照我校“大基础教育，宽口径培养，按需要选择，主辅修结合，强能力训练，重素质培养”的本专科人才培养总体思路，生物化学实验从理论教学中剥离出来，单独行课，单独考核。 按照四川农业大学1998年公布的本科教学计划，原基础生物化学、动物生物化学、食品生物化学合并为一门课——生物化学及分子生物学基础。其中的实验部分单列为一门课，名称为基础生物化学实验，36学时，1学分。本课程的任务是教授生物化学实验技术的基础理论及应用，并通过具体的实验教学使学生掌握常用的生物化学实验技术理论和方法，并能进行独立的实验操作，从而促进学生从事科学研究和技术工作的基本素质的提高和创新意识的培养。据此，我们对原三门实验教学大纲进行综合修改。新大纲由两部分组成，一部分系统介绍常用生物化学实验技术的基本原理和应用；第二部为具体的生物化学实验。在原已开设实验的基础上，新增添了部分生物化学大实验和一些综合性实验等新内容。将动物、植物、食品生化实验内容综合，实验材料可根据不同的专业而选定，由此建立生物化学实验技术的完整体系，拓宽学生的知识面。本最初以《》为教材，经过实施和改进，证实这种综合性实践教学课程的设置不仅加深了学生对基本概念和，使学生的理论学习和实践过程有机结合，同时，也为学生提供了，提高了学生的实践能力。pH值有关。在一定pH条件下，就会解离而带电，带电的性质和多少决定于蛋白质分子的结构及溶液的pH。在某一pH条件下，蛋白质分子所带的正电荷数恰好等于负电荷数，即净电荷等于零。此时蛋白质质点在电场中不移动，溶液的这一pH值称为该蛋白质的等电点（pI）。如果溶液的pHpI，则蛋白质分子结合一部分H+，而带正电荷在电场中就向负极移动。反之，溶液的pHpI，则蛋白质分子会解离一部分H+而带负电荷，此时蛋白质分子在电场中就会向正极移动。 COOH COO- COO- +H+ -H+ Pr Pr Pr -H+ +H+ NH3+ NH3+ NH2 阳离子 两性离子 阴离子 pHpI pH=pI pHpI 在电场中： 带正电，向负极移动 不移动 带负电，向正极移动 由于各种蛋白质解离基团的种类和数量不同，因此等电点也不相同。蛋白质在等电点时净电荷为零，溶解度最低，易发生聚沉。配制不同pH的缓冲溶液，通过观察蛋白质在这些缓冲液中的溶解情况，即可大致确定其等电点。 实验二 可溶性蛋白质含量的测定—双缩脲法（3学时） 目的和要求：掌握测定可溶性蛋白质含量常规测定的原理和操作方法，熟悉分光光度计的使用。 实验内容：本实验介绍双缩脲法测定可溶性蛋白质的含量。双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)可由两分子尿素加热至180℃左右生成，它在碱性条件下能与Cu2+结合生成紫红色络合物（称双缩脲反应）。而蛋白质分子中含有两个以上相邻的肽键，其结构与双缩脲类似，因此也能发生双缩脲反应，生成紫红色络合物，其反应后溶液颜色的深浅与蛋白质（浓度）含量在一定范围内呈线性关系，符合比尔定律，而且与蛋白质的分子量及氨基酸成分无关，受蛋白质特异性影响较小，故可利用此反应通过比色法测定蛋白质的含量，该法测定蛋白质浓度范围为1-10g/L。 实验三 薄层层析法分离鉴定植物组织中游离氨基酸（3学时供选作） 目的和要求：了解层析技术的一般原理，分类及应用范围。重点掌握薄层层析法的原理及操作技术，用以分离鉴定植物组织中游离氨基酸组分。 实验内容：本实验以硅胶G制成薄板来分离鉴定植物组织中的游离氨基酸组分。硅胶G加有10—15%的煅石膏粉作为粘合剂，是微酸性的吸附剂，以它作为固定相，选择适当的溶剂作流动相，由于各种氨基酸的极性不同，被硅胶G吸附的程度和在流动相中的溶解度不同。层析时，点在硅胶G薄板上的混合氨基酸被不同程度地吸附，当流动相从固定相上流过时，各组分也就不同程度地被溶解（解吸），然后又再被吸附、再溶解再吸附，从而以不同速度