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第十四章 微生物分布与消毒灭菌 学习目标 1、掌握： 消毒、灭菌、防腐与无菌操作的概念 2、熟悉： 常用的理化消毒、灭菌方法 3、了解： 细菌在自然界和人体的分布 第二节 消毒灭菌 相关概念 1、消毒： 杀死外环境中的病原微生物（不能杀灭芽胞） 2、灭菌：杀灭物体上所有微生物（杀灭芽胞） 3、防腐：防止或抑制微生物生长繁殖（没有杀灭微生物） 4、无菌：物体上不含活的微生物 （灭菌的结果） 无菌操作：防止微生物进入机体或其他物体的操作技术 一、 物理消毒灭菌 （一）热力消毒灭菌法 热力破坏微生物的蛋白质与核酸，导致微生物死亡 分湿热灭菌法和干热灭菌法两种 1、湿热消毒、灭菌法 1）高压蒸气灭菌法（最常用最有效杀芽胞方法） 103.4kPa ，121.3 C 15－30min 应用： 耐湿耐热物品，如手术器械、手术衣、敷料、注射器、普通培养基、橡皮手套、生理盐水等 1、湿热消毒灭菌法 2）巴氏消毒法 61.1－62.8OC 30min 71.7OC 15－30S 应用： 营养和品质易被高温破坏的物品，如牛奶、酒类等 1、湿热消毒、灭菌法 3）煮沸法 100OC 5min杀繁殖体， 1-2h杀芽胞 应用：食具、外科手术器械、注射器、胶管 4）流通蒸气法 消毒法 100OC 15－30min 1、湿热消毒、灭菌法 5）间歇蒸汽灭菌法 100OC 15 - 30min→ 37OC 温箱过夜，反复三次，杀死细菌繁殖体和芽胞 应用： 不宜长时间高温的物品，如含血清培养基 2、干热灭菌法： 焚烧法：废弃的污染物、尸体等 烧灼法：接种环、试管口等 干烤法：160－170oC 2小时 应用于玻璃器皿、瓷器等 （二）辐射杀菌法 1、紫外线 杀菌机制：波长为260－266nm的紫外线作用最强，破坏DNA分子构型，干扰DNA的复制与转录 特点：穿透力弱 用途：物体表面或空气的消毒 注意：对人体的皮肤和眼角膜有损伤 紫外线杀菌 有效距离：物品：25～60cm 空气：＜2m 照射时间：灯亮 5～7min后开始计算 ＞30min 日光曝晒法：6h可达消毒目的 适用：被褥、床垫、毛毯、衣物等 （二）辐射杀菌法 2、电离辐射 X射线、γ射线等，有较高的能量和穿透力，因而可以产生较强的致死效应 俗称“ 冷灭菌”，用于不耐热物品的灭菌：一次性注射器、敷料、导管等 3、微波 波长为1mm至1m的电磁波， 用于食品、餐具、医疗药品及耐热非金属材料器械等 （三）超声波杀菌法 超声波：不被人耳感觉到的频率超过20000Hz的声波 杀菌作用：可裂解多数细菌，G 尤为敏感 应用：费用高，用于粉碎细胞，提取细胞组分 二、 化学消毒灭菌法 （三）消毒剂的应用：只能外用 1、手和皮肤 2、黏膜 3、患者排泄物与分泌物 4、饮水 5、环境消毒 6、医疗器械 练习题 1.杀灭芽胞最常用和最有效的方法是： a.紫外线照射 b.煮沸5min c.巴氏消毒法 d.流通蒸气灭菌法 e.高压蒸气灭菌法 2.灭菌方法错误的是 a.手术室空气-紫外线 b.排泄物-漂白粉 c.饮水-氯气 d.温度计-75%酒精 e.含血清培养基-高压蒸气灭菌 3.下述不可能杀灭细菌芽胞的方法是： a.煮沸法 b.巴氏消毒法 c.间歇灭菌法 d.干热灭菌法 e.高压蒸气灭菌法 4.关于紫外线，说法错误的是 a.其杀菌作用与波长有关 b.可损坏细菌的DNA构型 c.265-266nm杀菌作用最强 d.其穿透力弱，故对人体无损害 e.紫外线适用空气和物体表面的消毒 5.常用于空气或物体表面的消毒 a.高压蒸气灭菌法 b.紫外线照射法 c.滤过除菌法 d.巴氏消毒法 e.干烤法 6.常用于基础培养基灭菌 a.高压蒸气灭菌法 b.紫外线照射法 c.滤过除菌法 d.巴氏消毒法 e.干烤法 7.常用于手术器械的灭菌 a.高压蒸气灭菌法 b.紫外线照射法 c.滤过除菌法 d.巴氏