生物测定方法1风洞用于研究飞行昆虫对具有挥发活性化学.ppt

化学生态学研究常用技术 化学生态学涉及许多方法和技术，有的是生物学研究的通用方法，如化学分析，有的则是化学生态学特有的研究手段。 一、生物测定方法 1）风洞 用于研究飞行昆虫对具有挥发活性化学物质的行为反应和飞行轨迹。可与摄像机和计算机相结合，进行昆虫行为和三维飞行轨迹的分析处理。 昆虫触角接收起通讯联络作用的化学信息物质，并将其信号传递到中枢神经系统，中枢神经系统对信号进行整合，进一步将整合的信号传递给运动神经元，从而支配昆虫行为反应。昆虫受性信息素刺激后，先是“兴奋”，即触角前伸，并稍有摆动，然后爬行，再以锯齿形逆风飞行，起飞后沿性信息素气味轨迹前进，最后在性信息素源附近降落后，搜索雌蛾，并接近雌蛾，进入预交尾阶段。 性信息素诱导雄蛾的行为反应大致分为两类：“长距离”趋化运动，引起这种飞翔行为的化学组分称作性信息素主级成分(Primary components)，为远距离召唤，起刺激雄蛾作长距离逆风定向飞行，超过1m，不激起性行为；“近距离”行为反应，激起雄蛾降落、振翅、撒开味刷和交尾企图等行为的化学组分谓之信息次级成分(Second components)，可以激起近距离内的性行为反应。 鳞翅目蛾类在风洞内对性信息素的行为反应研究得最为详细，行为反应的典型序列为：兴奋－起飞－定向－沿性信息素气迹“之”字形逆风飞行－近距离定位－降落－搜寻性信息素源－探测－预交尾－交尾。 利用风洞技术在实验室内模拟昆虫的行为反应进行研究和测定，比田间观察更为方便 。第一，环境条件可以人为控制，一次设定一个可变条件，其它条件固定，这样容易找出影响昆虫飞行的因素，获得它们与行为变化间的关系；每次试验中温度、湿度、风速和携带有化学物质的气流可以保持一致，不必像在田间那样考虑这些条件的变化。 第二，虽然风洞无法同时再现田间那样的气缕和远距离传送的低浓度信息化学物质，但应用可变的释放速率，也可以使昆虫昆虫表现出对远或近距离的行为反应；在昆虫飞行时移动风洞底部的可视图版，同样可以模拟昆虫远距离的飞行。 第三，风洞实验可以常年进行，而田间试验则受季节的限制。第四，风洞是个非常灵敏的装置，可以测定几个纳克的化学物质引起的昆虫的行为反应。 2）嗅觉仪：用于观察飞行昆虫和步行昆虫对挥发性化学物质的嗅觉定向和行为反应，有“Y”型、单管型、二管型和四臂型等多种形式。使用嗅觉仪，可以近距离观察昆虫的行为，而且设计简单、造价低廉、使用方便。 工作原理 　　每种昆虫所喜欢各种气体味道不同，在各个通道端，连接上不同的气味源，昆虫会爬向喜欢的气味一端，从以知道各种昆虫的嗅觉性能。 空气压缩机将经过空气过滤器过滤过的干净空气以恒定的压力、流速通过诱集瓶的进气口(或联结管的进口孔)，在诱集瓶内信息气味物质与干净空气混合而形成带有不同气味的空气流，通过四个臂进入到中央活动室混合后，由顶端出气口流出。在测试前，将生理指标一致的测试昆虫由出气口放人中央活动室，当气路开通时，测试昆虫在中央活动室与带有信息物质的气体流相遇，而后逆风飞行进入特定的臂内，再沿着气味的浓度梯度进入只能进不能出的诱集瓶内。 测试一定时间后，检查各诱集瓶内的测试昆虫数量。检查各诱集瓶内的测试昆虫数量，按下列公式计算出反应率、诱集率及选择系数，并对处理和对照的诱集率进行 测验 基本结构 1 空气过滤器：包括硅胶、活性碳、高分子多 L吸附剂组成的3级空气过滤器。其主要功能是除去空气中的水分及有机物质， 以获得纯净的空气流。 2 流量计：用于测量、控制和调节通过四臂嗅觉仪各部分气流的流量。 3 空气压缩机：提供压力恒定、流速恒定的空气流。 4 红外录相设备：包括红外摄像镜头、红外灯、监视器、录相机。用于标定夜出性昆虫的活动节律及剖析整个试验结果。 主要功能为： ①为测试昆虫提供活动的空间：②放置不同的信息物质，形成带有不同气味的空气流： ③收集、观察对气味信息物质有反应的测试昆虫。 (3)叶碟法(1eaf disc)：用于测定植食性昆虫对非挥发性化学物质的取食反应，特别适用于进行拒食剂的实验。有非选择性、二项选择性和多项选择性等多种实验设计方式。另外，也可以采用“三明治”方法(即把待测叫片夹在两片别的叶片之间)。 选择取食实验适用于昆虫对植物的味觉 反应，除了研究对不同植物的取食选择外，测试幼 虫对化合物的取食选择反应，只是在同一种植物的 叶碟上涂抹不同的化合物。但是，叶碟法的装置内 通风性能不好，因此不适用于测试昆虫的嗅觉反 应。另外对于刺吸式口器的昆虫，叶碟法也不适 用，因为离体的叶片内细胞的渗透压会很快发生改 变，这种变化一般都对刺吸