微生物生理学.第三章(GAI).pptVIP

1-32 EDTA---溶菌酶 破碎细胞 对数生长期细胞 原生质体 37度保温，离心 （二）载体物质生理活性的调节 在微生物里，某些与物质运输有关的酶，只有在膜电势存在的条件下，才有最大的活性。 1、膜电势调节 举例1：PTS中对葡萄糖的运输 还原型酶II（－SH） 氧化型酶II（－S－S－） （－SH）对基质亲和力高； 膜电势增加可以将（－SH）转变成（－S－S－），从而加快运输速率。 举例2：D-乳酸对脯氨酸吸收的促进作用 在膜囊里，D－乳酸是一种有效的电子供体；氰化 物是一种吸收抑制剂； 加入D－乳酸时，会促进膜囊对脯氨酸的吸收；但 加入D－乳酸脱氢酶的强抑制剂和氰化，会抑制乳 酸对脯氨酸的促进作用； 通过加入两种抑制剂，可以阻止建立膜电势，从 而降低膜囊对脯氨酸的吸收。 2、胞内磷酸糖的调节 某些不能被利用的磷酸糖进入细胞内，能抑制细菌和酵母菌对己糖和多元醇的吸收。 多元醇：经14C标记的甘油 实例 菌种：staphylococcus aureus 不能被利用的磷酸糖：甲基 — 硫代半乳糖苷 A与B内为S.au； A中加入甲基—硫代半乳糖苷，B中未加； 15分钟后加入甘油。 结果：A中细胞内放射性比B中低，说明A中S.au对甘油的吸收减少。 A B 实验过程： A中加入甲基-硫代半乳糖苷， B中未加； 但A、B同时加入甘油。 结果：开始时，AB中甘油的吸收速率相同；几分钟后，A中的放射性减少，表现出抑制作用。 A B 甲基-硫代半乳糖苷只有进入细胞内并积累之后，才能有效地抑制金黄色葡萄球菌对甘油的吸收。 结论 3、主动运输（active transport） （1）与促进扩散的区别 消耗能量、逆浓度梯度运输。 （2）主动运输的类型（按能量来源） 质子驱动的运输 ATP动力型运输 脱氢酶催化、偶联的物质运输 A、质子驱动的运输 能化膜：由于膜内外两侧质子浓度差的 建立，使膜形成电位差，从而 使膜处于充电状态。 Ⅰ、质子浓度差的建立 光 能：含有细菌叶绿素的光合细菌和含有其他色素 的细菌，吸收光量子后，排除质子，建立浓 度差。 呼吸能：好氧微生物及兼性厌氧微生物。基质脱下的 电子经呼吸链传递给氧，排除质子，建立浓 度差。 化学能：厌氧微生物。利用发酵过程产生的ATP，经 水解产生ADP和Pi，同时排除质子，建立浓 度差。 Ⅱ、运输方式 初级主动运输（primary active transport） 质子由胞内排出胞外的运输方式。 次级主动运输（secondary active transport） 由膜内、外电势梯度变化引起的物质运输方式。 初级主动运输和次级主动运输的偶联机制 载体蛋白与被运输物结合 —— 载体蛋白（渗透酶）与质子结合利用质子动力将结合在其上的基质运送到细胞内。 primary active transport and secondary active transport 次级主动运输的类型 同向运输或共运输（symport or cotransport）: 载体蛋白上结合的基质与质子同方向被运送到细胞内的过程。 逆向运输（antiport ）: 载体蛋白将H+运入膜内，同时将Na+运至膜外，两种物质运输的方向相反。 B、ATP动力型的运输 特点： 在ATP水解过程中，不会引起细胞质 膜内外电位差的建立，而是直接偶联 着物质的运输。 质子动力型对氧化磷酸化的