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第二章 遗传标记;本章主要内容;遗传标记的类型;遗传标记的类型;即植物的外部形态特征。主要包括肉眼可见的外部特征,如:矮秆、紫鞘、卷叶等;也包括色素、生理特性、生殖特性、抗病虫性等有关的一些特性。
优点:形态标记简单直观、经济方便;
缺点:(1)数量在多数植物中是很有限的;(2)且多态性较差,表现易受环境影响,(3)有一些标记与不良性状连锁。(4)形态标记的获得需要通过诱变、分离纯合的过程,周期较长。因此形态标记在作物遗传育种中的作用是有限的。
;(一)、形态标记的应用;(二)应用实例;2)不同棉花材料的形态学观察;(亚比棉×陆地棉 )杂种F1与其亲本的形态特征比较 ;(亚比棉×海岛棉)杂种F1与其亲本的形态特征比较 ;; 即植物细胞染色体的变异:包括染色体核型(染色体数目、结构、随体有无、着丝粒位置等)和带型(C带、N带、G带等)的变化。
与形态标记相比,细胞学标记的优点是能进行一些重要基因的染色体或染色体区域定位。但细胞学标记材料需要花费较大的人力和较长时间来培育,难度很大;同时某些物种对染色体变异反应敏感;还有些变异难以用细胞学方法进行检测。因此到目前为止,真正应用于作物遗传育种研究中的细胞学标记还很少。
;(一)核型和核型分析定义; 2.核型分析:核型分析就是指对核型的各种特征进行定量和定性的表述。核型分析是分析染色体数目和结构变异的基本手段之一。它在杂种细胞的染色体研究和基因定位,单个染色体的识别等方面具有重要意义。 ;什么是染色体分带技术;人类染色体核型分析(Q带);女;Eg 蚕豆的核型分析;(二)核型分析的应用;(三)核型分析内容;(四)核型分析的方法;2.预处理;
1)固定目的:主要是利用化学药物能迅速杀死细胞,从而使得蛋白质变性和沉淀,并能尽量保持各种结构的原有状态。
2)固定液:主要使用的固定液是卡诺固定液(1:3的冰乙酸和无水乙醇);3)固定所需要的时间:2—24小时,小材料,固定的时间应短一些,而对于大一些的材料,则固定的时间可以长一些。
4)固定所需要的温度;一般固定是在低温冰箱里,但这并不是必需的条件。
5)???存;经过固定后的材料可以保存在70%的酒精中待用。
;4.解离;5.染色 ;6.压片操作;7.镜检;8.永久封片; 为了把好的染色体制片长久的保存下来,可以制作永久封片。作永久封片可以用冰冻脱片封片法,具体的做法如下:先把制好的染色体制片用冰冻制冷器进行冷冻,待冷冻后,用刀片把盖波片掀开,这个过程应该在没有解冻之前完成。然后分别把盖波片和载玻片放在37℃的烘箱中,将其烘干,等到烘干后,再在二甲苯中浸泡10-20min,最后用中性树胶进行封片。在这应该注意的一点是进行封片的时候应该把载玻片和盖波片分别进行封。当然,还有其他的方法也能进行制作永久制片。 ; 亚比棉的染色体形态图、核型图及核型模式图 ;图2-4 三种杂种(亚洲棉×比克氏棉)×陆地棉杂种F1的染色体形态图、核型图及核型模式图;图2-4 三种杂种(亚洲棉×比克氏棉)×海岛棉杂种F1的染色体形态图、核型图及核型模式图; 生化标记就是利用电泳技术对蛋白质、酶等生物大分子进行鉴定。主要包括同工酶和等位酶标记。
同工酶是:指结构不同、功能相似的酶,也即具有同一底物专一性的不同分子形式的酶。属于一个以上基因座位编码的酶的不同形式;
等位酶是指由一个基因座位的不同等位基因编码的酶的不同分子形式。分析方法是从植物组织的蛋白粗提物中通过电泳和组织化学染色法将酶的多种形式转变成肉眼可辩的酶谱带型。; 1, 3, 5, 7, 9 分别为晋A 不育系的叶片、苞叶、花蕾( 造孢细胞增殖时期、小孢子母细胞减数分裂时期、小孢子形成时期) , 2, 4, 6, 8, 10 分别为保持系的叶片、苞叶、花蕾( 造孢细胞增殖时期、小孢子母细胞减数分裂时期、小孢子形成时期) 。
图1 棉花晋A 及其保持系酯酶酶谱及模式图。; 1, 3, 5, 7, 9 分别为晋A 不育系的叶片、苞叶、花蕾( 造孢细胞增殖时期、小孢子母细胞减数分裂时期、小孢子形成时期) , 2, 4, 6, 8, 10 分别为保持系的叶片、苞叶、花蕾( 造孢细胞增殖时期、小孢子母细胞减数分裂时期、小孢子形成时期) 。
图2 棉花晋A 及其保持系过氧化物酶谱及模式图。; 生化标记具两个方面的优点:一是表现近中性,对植物经济性状一般没有大的不良影响;二是直接反映了基因产物差异,受环境影响较小。但目前可使用的生化标记数量还相当有限,且有些酶的染色方法和电泳技术有一定难度,因此其实际应用受到一定限制。 ;(一)生化标记的应用;四 分子标记;(一) 分子标记的定义:
;(二)目前的分子标记类型;(三)分子标记的
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