杂交贻贝的全人工繁殖及其胚胎发育.docVIP

注：1、稿件修改红字添加，兰字删除；2、修改意见附后；3、修改定稿 出文章编号：常抗美，刘慧慧（浙江海洋学院海洋科学研究所，浙江 舟山 316004）摘要：紫贻贝和厚壳贻贝种间杂交生产性试验获附着稚贝3.77亿粒平均壳长1.13mm、平均壳高0.78mm，育苗成活率达35.57%。 关键词：紫贻贝；厚壳贻贝；杂交；杂种优势中图分类号： 文献标识码：贻贝我国养殖紫贻贝（Mytilus galloprovincialis Linnaeus）、厚壳贻贝（Mytilus coruscus Gould）和翡翠贻贝Perna viridis Linnaeus）三种。早在20世纪70年代，国内贻贝海区半人工采苗获得大量的稚贝由于种质、病害和环境等因素的影响，贻贝海区半人工采苗产量和质量有持续下降的趋势，培育生长速度快、抗逆能力强的优良品种成为解决贻贝养殖的技术关键之一为解决我国养殖贝类大规模死亡和一些重要经济贝类生长慢、生产周期长等问题，杂交及杂种优势利用成为产业生存和发展的迫切需求 []。国内在牡蛎、扇贝、鲍鱼、珍珠[2-3]等养殖贝类的种内杂交、种间杂交已经取得了进展，使我国成为贝类产业中应用杂种优势解决重大问题所取得的效果最好、得益最多的国家。嵊泗县是浙江省贻贝主产区，养殖产量约，同时，该县也是我国及东海区厚壳贻贝的主要分布区和养殖区近十年来，在嵊泗列岛贻贝集中养殖海区，每年自然附着一批同时具有厚壳贻贝和紫贻贝外形特征的贻贝，其生态学特征及加工后的出肉率、口感等性状，介于两种贻贝之间。由于该贻贝是在紫贻贝引进之后才出现的，当地养殖业者称其为杂交贻贝[]，沈玉帮[5-6]用分子生物学的方法也证实了紫但迄今为止还没有种间杂交的报道。厚壳贻贝为验证紫贻贝与厚壳贻贝杂交的可能性及其在养殖生产中的应用价值，并进一步研究其生产性育苗技术，2005年2006年紫1 材料与方法 1.1 紫贻贝辽宁省大连海区养殖贻贝，购自平均壳长6.04㎝，平均壳高3.37㎝；厚壳贻贝采捕自浙江省舟山市普陀区东极海区野生种，平均壳长10.5㎝，平均壳高5.03㎝。紫贻贝0kg，厚壳贻贝0kg。 试验在浙江省嵊泗县石柱该厂具备较完善的供水、供气、供热、供电及藻类培育等附属配套设施。育苗池，池 m×3.6m×1.4m，育苗 m3。育苗用水取自海域的自然海水，经24h以上黑暗沉淀和砂滤。1.2 方法 1.2.1 亲贝强化培育获得亲贝后，剪去足丝和壳外附着物，经过清洗后，用浓度15g/L的KnO4溶液药浴15～20min，再将亲贝放入育苗池进行强化培育。亲贝蓄养密度为3.0～4.5㎏/m，水深30～40㎝光照1000LX。日换水100%。饵料以扁藻日投密度）/ml [11]。 1.2.紫贻贝(正交组)；② 厚壳贻贝♀×紫贻贝(反交组)；③ 厚壳贻贝自交组；④ 紫贻贝1.2.3 人工催产与采卵将紫贻贝和厚壳贻贝亲贝消毒清洗，分别置于干燥通风处阴干刺激h～15h和流水刺激1h，将亲贝放入采苗池中的采苗网帘上使其静水排放，观察亲贝的产卵及排精状况，挑选出所需雌、雄紫贻贝亲贝和雌、雄厚壳贻贝亲贝1h，再经20mg/的KnO4消毒清洗后，放入新池进行二次静水排放。当水体中受精卵的密度达/ml，每个池受精卵达10.8亿粒时，取出亲贝产卵池连续充气，100目筛绢捞网清除上浮的泡沫和污物当胚胎至期，采用池底排水的方法用0目筛绢网箱收集幼虫，进行计数，直线铰合幼虫紫贻贝厚壳贻贝移入育苗池中进行培育±0.5个/ml。1.5 浮游幼培育从至匍匐幼虫的培育培育条件：水温15.8～20.3℃，盐度27.1～28.2，H8.0～8.2，溶解氧5mg/L以上，氨氮0.2mg/L以下，光照500～1000LX。换水：每早上用虹吸法或池底排水法换水1次，总换水量从培育初期30%逐渐增加至培育后期的100%。饵料及投喂：选择等鞭金藻（Isochrysis sp）、小硅藻Nitzshia closterium）、微绿球藻扁藻Platymonas sp）作为贻贝幼虫的饵料。日喂饵二次，早上换水后投喂一次，傍晚根据培育水体中藻类的密度投喂一次。饵料投喂密度见表1。 育苗管理：贝类育苗的常规管理。表1 贻贝浮游幼虫饵料投喂Tab.1 The quantities of live foods feeding the larva of Mytilus 饵料品种幼虫期别金藻万/ml微绿球藻万/ml小硅藻万/ml扁藻万/ml至壳顶初期幼虫 壳顶初期至壳顶中期幼虫 壳顶中期至壳顶后期幼虫 0.5～1.51.0～2.02.0～3.01.0～2.01.0～1.52.0～3.00.5～1.01.0～2.02.0～3.00.1～0.20.2～0.3 1.6 稚贝培育当眼点幼