实验的方案细化版.docxVIP

卵形鲳鲹海水池塘混养研究主要研究内容：1、本研究混养模式理化、生物环境；2、本研究混养模式N、P收支及转化率；3、本研究混养模式 能量收支及转化率；4、基于C、N稳定同位素定性定量分析卵形鲳鲹饲料、粪便、残饵去向，从机理水平上解析本研究混养模式的优劣。5、其他。工作展开及细化方案如下：①相关文献资料的查阅整理归纳，初步从理论上确定卵形鲳鲹与篮子鱼、鲻鱼、青蟹及斑节对虾的合理搭配比例，各混养品种种苗的科学投放顺序及种苗规格，以及各阶段投喂饲料的种类。放苗时间4月～5月，每667m2先投放南美白对虾苗2万尾~3万尾,10d～20d后再投放2.5 cm~3 cm的淡化卵形鲳鲹苗1500尾～2000尾,h≈2m,S=5~25‰,T=22~33℃,pH=6.8～9.6,DO=2.5mg/L,养殖周期120天左右，Tra=30-40cm。其他。②相关生产管理、气象资料的收集，获取降雨、太阳总辐射、进出水及养殖水体量，主养生物放养、收获情况（数量、规格、种类及重量等），各阶段投饲情况（饲料种类、投喂量和投喂频率等），微生物制剂(EM菌等)、底质改良剂投放等。进水用60目～80目筛网过滤,每667 m2泼洒120 kg~150 kg生石灰进行消毒,3d后将水排干,再进水60cm～80 cm；投苗前20d,每667 m2施100 kg~150 kg发酵有机肥(添加EM菌等)进行肥水；4月、5月卵形鲳鲹放苗，前期不用投料, 10 d后开始投喂10%全价配合饲料,混养生物不再另行投饵；养殖中期加开增氧机,每10 d~15 d使用优质底改、EM菌、光合菌等；到7月,鱼重达到250 g基本可达上市。其他。③采样周期：10d；采样点：(进水口、出水口、投饲区、中央区)*（表层、1/2透明度和底层）；T-表层水温表测量；S-盐度计测定；DO-溶氧仪测定；pH-pH计测定；Tra-透明度盘观测。初级生产力-用黑白瓶法测定。每次采样测定1次。瓶容积为150mL,分三层挂于水中,分别为表层、1/2透明度和底层。每层挂黑瓶1个、白瓶2个,装采自各层的水样,同时测初始溶解氧。05:00开始挂瓶,24 h后摘瓶测定溶解氧。根据当量关系,按照1gO2=6.1g浮游植物湿重,1mgO2=14.56J,利用黑白瓶法计算出浮游植物的初级生产力,并计算出能值。其他。④现场样品采集→样品预处理→样品实验室处理分析→数据记录。水样（包括降雨、进出水及养殖水体水样）：叶绿素水样的采集。从放苗到收获，每 10 天采集一次。分别在混养池塘和单养池塘设定的采样点及深度，用采水器采集水样各 500ml碳酸镁固定冷藏，带回实验室，立即测定。浮游生物水样的采集。从放苗到收获，每 10 天采集一次。分别在混养池塘和单养池塘设定的采样点及深度，用采水器采集水样各 1000ml，取1000ml水样加入 10ml 鲁哥氏液（5克碘和10克碘化钾溶于85mL蒸馏水中，碘的总浓度为150mg/mL。）固定冷藏，带回实验室用于浮游植物的种类鉴定和计数。微生物水样的采集。从放苗到收获，每 10 天采集一次。分别在混养池塘和单养池塘设定的采样点及深度采集水样，然后装在已灭菌的样品瓶中，冷藏带回实验室进行种类鉴定和计数。采样时间每次均在上午 9 点 30 分左右。其它指标水样采集。从放苗到收获，每 10 天采集一次，分别在混养池塘和单养池塘设定的采样点及深度采集水样，浓硫酸（1:3）酸化、冷藏→100mL水样进行COD测定；→消解器消解50mL/指标进行TP、TN、NH4+-N、NO3--N、NO2--N、PO43--P测定；→现场大量水样隔膜抽滤（过滤膜为孔径 0.45μm GF/C Whatman玻璃纤维素微孔滤膜，450度灼烧4 h，滤膜使用前应先用体积分数为 1%的盐酸浸泡 12h，然后用蒸馏水冲洗至中性，浸泡于蒸馏水中备用）→滤渣60℃，24h烘干研磨过60目筛子，1g左右氧弹仪能量折算；其余加入甲醇：氯仿：水（10:5:4）溶液振荡摇匀，1800r/s离心10min，去除上清液。重复3次以充分去除样品中的脂类。在最后一次脂类去除操作中加入2 ml甲醇，离心获得的沉积物60℃干燥，重新研磨称取 710-800μg装入小锡囊→δ13C、δ15N等测定→数据记录。 每次采样前用少量水样荡洗水样瓶 2～3 次，应在 2h 内测定各营养盐指标，若不能及时检测，应加入占水样体积 2‰的三氯甲烷，盖好瓶塞，剧烈震摇一会，放入冰箱 4℃低温保存。底泥样（包括间隙水样）→实验初将直径8cm、高15cm的玻璃瓶置于每个采样点底部中央,每次采样收起,测量和收集瓶内底泥沉积物（或是潜水直采）→冷藏预处理→底栖生物、微生物等分析→60℃，24h烘干研磨→部分TP、TN、NH4+-N、NO3--N、NO2--N、PO43--