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基因工程 教材：《基因工程》第二版，龙敏南 主编，科学出版社 参考书：《基因工程》第二版，张惠展 主编，高等教育出版社 《Molecular cloning》第三版中文版，Sambrook J., 科学出版社 基因工程(Gene engineering) 是指按照人们的愿望，依据严密的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，有目的地改造生物物种特性，创造出更符合人们需求的新的生物类型的过程。 一、 基因工程的发展历程与基础 (一)基因工程的发展史 人们对基因的认识经历了长时间的发展过程。 1866年,孟德尔,遗传因子,已形成了基因的雏形。 1909年,丹麦的遗传学家W.L.Johanssen首次提出用 ‘gene’来代替孟德尔的遗传因子（谈家桢首先将gene翻译为基因），提出了基因型和表现型的区别，但并未涉及遗传的物质概念。 1910年以后，美国遗传学家以果蝇为材料进行杂交实验，第一次把代表某一性状的特定基因与某一特定染色体上的特定位置联系起来，发现了连锁交换定律。摩尔根（T.H.Morgan）提出了遗传粒子理论，认为基因是一粒一粒在染色体上呈直线排列的，且互不重叠。摩尔根理论的重要性在于基因已不在是一个抽象的符号，而是与染色体紧密相关的一个实体。 1953年，Watson和Crick提出了DNA双螺旋结构模型，阐明了DNA的半保留复制模式，从而开辟了分子生物学研究的新纪元。这时，人们接受了基因是具有一定遗传效应的DNA片段的概念。 1955年，Benzer基于T4噬菌体的顺反互补试验，提出了顺反子的概念。到此为止，已经从功能单位的意义上把顺反子和基因统一起来了，顺反子实际上成为基因的同义词。 20世纪60年代，法国遗传学家F.Jacob和J.Monod在研究细菌基因调控中证实：基因是可分的，功能上是有差别的，即既有决定合成某种蛋白质的结构基因，又有编码阻遏或激活结构基因转录和合成蛋白质的调节基因，还有其他无翻译产物的基因。 1.基因是实体，它的物质基础是DNA或（RNA）。 2.基因是具有一定遗传效应的DNA分子中的特定核苷酸序列。 3.基因是遗传信息传递和性状分化发育的依据。 4.基因是可分的。根据基因的产物可将其分为编码蛋白质的基因、无翻译产物基因（如tRNA和rRNA）以及不转录的DNA区段（如启动区、操纵基因、内含子等）。 概括说来，基因是一个含有特定遗传信息的核苷酸序列，它是遗传物质的最小功能单位。 基因 基因工程(Gene engineering) 其主要原理是应用人工方法把生物的遗传物质，通常是脱氧核糖核酸(DNA)分离出来，在体外进行切割、拼接和重组。然后通过载体将重组了的DNA导人某种宿主细胞或个体，进行无性繁殖，从而改变它们的遗传品性；或使新的遗传信息在新的宿主细胞或个体中大量表达，以获得基因产物(多肽或蛋白质)。这种创造新生物并给予新生物以特殊功能的过程就称为基因工程，也称DNA重组技术。 (二) 基因工程的理论基础 1.不同的基因具有相同的物质基础。所有生物的DNA的基本结构都是相同的。 2.基因是可切割的。 3.基因是可以转移的。 4.多肽与基因之间存在对应关系。 5.遗传密码是通用的。 6.基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。 (三) 基因工程的技术基础 1.限制性内切酶 2.DNA连接酶 3.基因克隆载体 4.基因转移技术 二、基因工程的技术路线与研究内容 (一)基因工程的技术路线 上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技术）；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。 基因工程的基本形式 第一代基因工程 蛋白多肽基因的高效表达 经典基因工程 第二代基因工程 蛋白编码基因的定向诱变 蛋白质工程 第三代基因工程 代谢信息途径的修饰重构 途径工程 第四代基因工程 基因组或染色体的转移 基因组工程 (二)基因工程的基础研究 1.基因工程克隆载体的研究 2.基因工程受体系统的研究 3.目的基因研究 4.基因工程工具酶的研究 5.基因工程新技术研究 (三)基因工程的应用研究 1.基因工程药物研究 2.转基因植物研究 3.转基因动物研究 4.其他方面 全