总SOD活性检测试剂盒WST-8法-碧云天.PDF

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：order@ 技术咨询：info@ 碧云天网站 微信公众号 网址： 总SOD活性检测试剂盒(WST-8法) 产品编号 产品名称 包装 S0101 总SOD活性检测试剂盒(WST-8法) 100次 产品简介：  碧云天的总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)(Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8)是一种基于WST-8的显色反应， 通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。  超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)能催化超氧化物阴离子发生歧化作用，生成过氧化氢(H O )和氧气(O ) ，是生物 2 2 2 体内一种重要的抗氧化酶。  目前有多种SOD活性测定法，其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差，易和 被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率达不到100%等，从而使检测的灵敏度和精确度受到影响；细胞色素C法也是 一种常用来检测SOD活性的方法，但细胞色素C其氧化活性高，易受样品中的还原剂干扰，另外该方法需要连续测定吸光度 值，对于SOD的检测灵敏度比较低，并且不太适合大批量样本的检测。  目前测定SOD 比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法，其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了 目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的WST-8法，可以检测出低达0.5U/ml 的超氧化物歧化酶。WST-8法的原理参 考图1，WST-8可以和黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)催化产生的超氧化物阴离子(O2.-)反应产生水溶性的甲臜染料 (formazan dye)，由于SOD能催化超氧化物阴离子发生歧化作用，所以该反应步骤可以被SOD所抑制，因此SOD的活性与甲 臜染料的生成量成负相关，从而通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。 图1. 基于黄嘌呤氧化酶偶联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO ：xanthine oxidase 。  WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物，可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力，适合高通量筛选研究。同时 WST-8法测定SOD酶活力时，最大抑制百分率可以接近100%，并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰，使检测效果比其 它的一些常见方法显著改善。  本试剂盒的性能优于同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT法) 。本产品的用途与同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT法)相 同，等量SOD导致的吸光度变化值显著大于NBT法，线性范围更宽。本试剂盒提供的SOD样品制备液能直接裂解细胞，无 需匀浆，操作更加便捷。  本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢，会干扰SOD的检测。本试剂 盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标准品 中添加高达0.1mM 的过氧化氢时，对于检测结果仍无显著影响。  本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以