防治烟草立枯病杀菌剂的室内筛选10-01-25.docVIP

烟草立枯病杀菌剂的室内筛选陈志敏1，张绍升2 1湖南省烟草公司张家界市公司，湖南 张家界427000； 2福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室，福建 福州350001 关键词：烟草立枯病；立枯丝核菌杀菌剂 摘要：采用生长速率法测定了世高瑞毒脱咪鲜胺锰盐三唑酮等4种杀菌剂对烟草立枯丝核菌的抑制作用，并在此基础上进行了复配筛选。结果表明，10%世高EC和12.5%瑞毒脱EC对烟草立枯丝核菌具有较强的抑制作用，EC50分别为0.56μg/mL和0.8μg/mL；由瑞毒脱和世高以有效浓度4：1混配的12%复配剂EC对病原菌抑制效果最佳，EC50为1.02μg/mL，共毒系数（CTC）为155.3，增效作用明显盆栽结果表明，12%复配剂1500液防治效果96%。S435.72 文献标识码： 文章编号: 烟草立枯病是由烟草立枯丝核菌Rhizoctonia solani kühn) 引起的烟草苗期病害，虽然在生产上为害较轻，若苗床管理不当、防治不及时，可导致死[1]。因此，加强苗期管理，及时施药防治，对于培育健壮烟苗、减少苗期及大田生产损失具有重要。本试验筛选对Rhizoctonia solani kühn具有良好的化学药剂，药剂间的最佳复配比例，提高杀菌剂对烟草立枯病的防治效果，避免长期单一施用化学药剂而病原菌产生抗药性，降低防治成本。 1材料与方法 1.1病原菌分离 采用常规组织分离法病原菌进行分离纯化。 1.2致病性测定 从培养3d的病原菌菌落边缘切取1×1cm大小的菌丝块贴于4～6叶期烟苗根茎部，用沾有灭菌水的脱脂棉保湿，置于26℃室内培养，以贴PSA培养基为对照，每处理5株烟苗，3次重复。3d后检查，并对发病植株进行再分离，以明确供试菌株的致病性。 1.3病原菌鉴定作者简介：陈志敏（1982—），男，硕士研究方向：植物病原学参考张敬泽[2]、黄江华等[3]的方法，将病原菌在PSA培养基平板上25℃条件下暗培养，菌落形态观察、菌落生长速度测定、菌核产生特点检查、挑取菌丝显微计测、菌核的解剖学检查菌丝细胞核数目的染色检查。鉴定工作按Sneh[4，5]和巴尼特H.L[6]等提出的程序和标准进行。 1.4防治药剂筛选 1.4.1供试药剂 10%世高EC（中国科学院植保所廊坊农药中试厂）12.5%瑞毒脱EC（山东省联合农药工业有限公司）0%咪鲜胺锰盐WP（上海迪拜农药有限公司）20%三唑酮WP（英国LK作物科学有限公司）。 1.4.2单剂室内毒力测定 将各供试药剂用灭菌水充分溶解，配制成有效浓度为10mg/mL的母液，并用细菌过滤器过滤除菌，置于4℃冰箱保存备用。 药剂毒力测定参考蒋家珍等[7]的方法。通过菌丝生长抑制概率值和药剂浓度对数值之间的线性回归分析，求出各药剂对病原菌的有效抑制中浓度（EC50值）。 1.4.3复配剂室内毒力测定 根据单剂室内测定的结果，按“比例混合法”[8]，将10%世高EC与12.5%瑞毒脱EC按有效浓度5:0、4:1、3:2、2:3、1:4、0:5比例混合，配成复配剂。药效测定参照1.4.2，求得各复配剂的EC50，并孙云沛[9]的方法求得各混剂的共毒系数（CTC），根据共毒系数的大小评价复配剂的增效作用CTC≥120表明具有增效作用；80﹤CTC﹤120为相加作用；CTC≤80为拮抗作用；并考虑药剂成本确定最佳配比。 1.盆栽防治试验 1..1菌土制备 菌土制备参考李艳琼等[10]的方法。 1..2药液配制 A．10%世高EC 1500B．12.5%瑞毒脱EC 2000C．12%复配剂EC 1500D．12%复配剂EC 2000。 1..3盆栽处理 将3～4叶期健康烟苗移栽于装有灭菌土的花盆（20cm×20cm）中，每盆10株，缓苗备用。接种时，在每株烟苗的根部周围盖上约7 g菌土，同时浇灌各供试药剂，每盆200mL，以浇灌等量清水为对照。每处理10株烟苗，3次重复。接种6 d后观察、记载其发病情况病害分级参考Lipps等[11]的标准。 2结果与分析 2.1病原菌鉴定 病原菌菌落初期为白色，绝大部分菌丝匍匐生长，气生菌丝很少。菌落生长速度较快，在25℃下培养菌落平均直径为4.2cm，培养菌落平均直径为8.4cm。菌丝蛛网状，有横隔图1A），初期无色，菌丝呈浅色至黄褐色，顶端菌丝直径4.6～8.5（6.3）μm，主干匍匐菌丝直径5.7～9.2 ( 8) μm，分枝呈钝角或几乎成直角，分枝与主干处有缢缩，附近形成隔膜。培养5d后，在菌落表面形成白色气生菌丝团，成浅褐色至黑褐色的小菌核，菌核无一定形状，一般扁平，常彼此相连，松散地分布在菌丝体中图B）。菌核由疏丝组织连结而成，外层和内层细胞是褐色或黑褐色，即内、外细胞的形态、大小和色泽无明显差异图1C）。经番红