提取、分离与精制过程中蛋白质活性的稳定性与保存.ppt

2、提取、分离和精制过程中蛋白质活性的稳定性和保存;蛋白质具有一定的不稳定性和脆性。所以长期以来，具有生物活性形式的蛋白质的分离被认为是一项极其困难的工作。;2.2 蛋白质的三维结构;折叠与伸展;当某些氨基酸残基的侧链基团按照它们的顺序形成精确的空间排列时，即可以称为活性位点时，就认为一个特定蛋白质具有某种生物活性。 对许多蛋白质而言，这就是其特殊的结合位点。;其一， 与活性位点有关，参与催化过程或与底物或受体的结合过程。 其二， 氨基酸残基的准确定位对促进和维持蛋白质三级结构是非常重要的。;* 蛋白质的变性(denaturation)的本质;蛋白质在各种力和键的相互作用下，多肽链从随机结构折叠成多种多样的具有活性的球状结构，但从熵的角度来讲，随机状态的自由能高于折叠状态，所以蛋白质的结构更倾向于形成较无序和较伸展的随机结构。;引起蛋白质不稳定的原因是伸展过程。 从天然的活性状态伸展成较随机（无活性）的状态时，有些蛋白质遵循简单的一级动力学过程，而有些蛋白质则包含着1个或多个相互独立、相对稳定的中间构象状态。因此伸展动力学有时简单，有时复杂，尤其是中间态表现出一定的生物活性的情况下。;1）温度升高（蛋白质和酶） 2）pH值的变化（使蛋白质表面离子化或发生电荷相反的变化） 3）水溶液中其它溶质（与蛋白质肽链中的N-H和C-O基团发生竞争性抑制） 4）溶液中的泡沫（泡沫可增