果蝇伴性遗传和三点试验.pptVIP

一、蚕豆叶肉细胞原生质体分离 第5周 遗传学实验课 二、蚕豆根尖微核检测 三、果蝇的伴性遗传及三点试验 内 容 一、蚕豆叶肉细胞原生质体分离 第5周 遗传学实验课 实验目的 了解植物原生质体的有关知识 学习酶法分离植物原生质体的方法 实验原理 植物原生质体：是除去细胞壁以后的裸露细胞。 主要特点：无细胞壁，具有细胞全能性，可在实验室大量、快速繁殖。 植物原生质体分离与培养的意义 细胞壁的再生与形成过程 细胞生理学研究：如质膜的表面特征、离子的吸收与转运、激素及抑制剂的作用机理等 外源物质的摄取：如病毒、细菌、细胞器、蛋白质等 植物细胞转基因：显微注射、基因枪、载体 体细胞融合：远缘杂交 性细胞的分离与培养：性细胞的功能、离体受精 植物原生质体分离的方法 机械法：高渗溶液处理后，研磨，得到球形原生质体 酶解法：纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶 渗透压稳定剂：甘露醇、山梨醇等 质膜稳定剂：氯化钙、葡萄糖硫酸钾 实验材料 蚕豆叶片 蚕豆：拉丁学名： Vicia faba Linn?，别称： 胡豆、佛豆、胡豆、川豆、倭豆、罗汉豆?， 双子叶植物，我国四川分布最多，次为云南和湖南 实验步骤 取生长肥嫩的蚕豆叶片，由镊子小心撕去下表皮 剪成0.5X0.5cm的小块，约10块，置青霉素小瓶中，叶背面朝下，加 2 ml 混合酶液（2%纤维素酶 + 2%果胶酶），37℃培养箱中暗培养酶解 1.5 h 取酶解液置载玻片上，盖上盖玻片，显微镜观察 第5周 二、蚕豆根尖微核检测 遗传学实验课 浸种催芽 用高盐或重金属其中一种液体处理根尖，设对照（自来水），三次重复，室温放置30分钟； 用自来水冲洗干净，放回铺有滤纸的培养皿，带回宿舍培养24h后，带到实验室滴加固定液固定，用于观察。 微核率的大小与用药剂量或辐射累积效应呈正相关，因此，微核是常用的遗传毒理学指标之一。 实验步骤 第5周 遗传学实验课 三、果蝇的伴性遗传及三点试验 模式生物--果蝇 2n = 8 实验目的 学习果蝇杂交技术，分析遗传数据 进一步认识伴性遗传的特点 掌握三点测验的原理与方法 掌握遗传图谱绘制原理与方法 实验原理 伴性遗传：遗传基因位于性染色体上的遗传现象 基因的连锁交换与基因定位 1、同一条染色体上的基因连锁 2、同源染色体的非姊妹染色单体之间发生交换， 产生重组型配子 3、重组率 (重组型配子占总配子的百分比) 反映交换率。 如果2个基因间只发生一次交换，重组率=交换率；如发生2次或2次以上交换，重组率交换率 4、基因间距离越远，越易发生交换，交换率越高 遗传作图 果蝇的遗传图谱 三点测交 野生型(+++) × 三隐性突变体（abc） 三因子杂种（abc/+++）× 三隐性突变体（abc） 2种亲本类型 6种重组类型 三因子的顺序及遗传距离 三点测交基因型模式图 w m sn w m sn + + + w m sn + + + w m sn 测交后代：2种亲本类型 6种重组类型 P F1 F2 × × m sn3 w + + + F1雌蝇 m sn3 w + + + m sn3 w + + + m sn3 w m + + + sn3 w + + + m sn3 w m sn3 w m sn3 w m sn3 + + + w + + + m sn3 w m + w + sn3 + 三点测交中F1配子的基因型 8种雌配子 2种雄配子 + + + F1雄蝇 测交的意义 实验材料 野生型（19#）：+ + + 红眼、长翅、直刚毛 突变体（6#） ：w m sn 白眼、小翅、焦刚毛 黑腹处（男女）果蝇 实验步骤 组合设计，在培养瓶上做好标记： 正交：野生型(+++) × 三隐性突变体（abc） 1瓶 解读：19#雌性（5头）与6#雄性（5头）