间接ELISA试验方案.pdfVIP

间接 ELISA 实验方案 需要偶联二抗的需要偶联二抗的 ELISA 测定的一般程序和提示测定的一般程序和提示 需要偶联二抗的需要偶联二抗的 测定的一般程序和提示测定的一般程序和提示 缓冲液和试剂缓冲液和试剂：（：（查看直接查看直接 ELISA 实验方案的缓冲液和试剂实验方案的缓冲液和试剂）） 缓冲液和试剂缓冲液和试剂：（：（查看直接查看直接 实验方案的缓冲液和试剂实验方案的缓冲液和试剂）） 要得到准确的定量结果，通常做法是比较未知样品与标准曲线的信号。每个酶标板都必须测 定标准品 （两重测定或三重测定）和空白样，以确保准确性。 一般程序一般程序：： 一般程序一般程序：： 将抗原包被到微孔板将抗原包被到微孔板 将抗原包被到微孔板将抗原包被到微孔板 1. 将抗原在 PBS 或其它碳酸盐缓冲液中稀释至 20 μg/ml 的最终浓度。移取50 μl 抗原稀释液 到 PVC 微量滴定板的第一排微孔中，使该微量滴定板的微孔上包被抗原。按需要在微量滴 定板上进行梯度稀释。 通常将含纯抗原的试样以低于 2 μg/ml 的浓度加到微量滴定板上。纯溶液不是 必需的，但是原则上，试样中超过3% 的蛋白质应为靶蛋白 （抗原）。抗原蛋 白质浓度不应超过20 μg