肿瘤细胞培养肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置-中国试剂网.PDFVIP

中国试剂网 3.8.1.50 肿瘤细胞培养 肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当 前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁 最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重 要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的 作用。 一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤细胞与体内正常细胞相比，不论在体内或在体外，在形态、生长增值、遗传 性状等方面都有显著的不同。生长在体内的肿瘤细胞和在体 外培养的肿瘤细胞，其差异较小，但也并非完全相同。培养中的肿瘤细胞具以下 突出特点： （－）形态和性状 培养中癌细胞无光学显微镜下特异形态，大多数肿瘤细胞镜下观察比二倍体细胞 清晰，核膜、核仁轮廓明显，核糖体颗粒丰富。电镜观察癌 细胞表面的微绒毛多而细密，微丝走行不如正常细胞规则，可能与肿瘤细胞具有 不定向运动和锚着不依赖性有关。 （二）生长增殖 肿瘤细胞在体内具有不受控增殖性，在体外培养中仍如此。正常二倍体细胞在体 外培养中不加血清不能增殖，是因血清中含有很细胞增殖生 长的因子，而癌细胞在低血清中 （2 ％～5 ％）仍能生长。已证明肿瘤细胞有自泌 或内泌性产生促增殖因子能力。正常细胞发生转化后，出现能 在低血清培养基中生长的现象，已成为检测细胞恶变的一个指标。癌细胞或培养 中发生恶性转化后的单个细胞培养时，形成集落 （克隆）的能 力比正常细胞强。另外癌细胞增殖数量增多扩展时，接触抑制消除，细胞能相互 重叠向三维空间发展，形成堆积物。 （三）永生性 永生性也称不死性。在体外培养中表现为细胞可无限传代而不凋亡（Apoptosis ）。 体外培养中的肿瘤细胞系或细胞株都表现有这种性状， 体内肿瘤细胞是否如此尚无直接证明。因恶性肿瘤终将杀死宿主并同归于尽，从 中国试剂网 3.8.8.150 而难以证明这一性状的存在。体外肿癌细胞的永生性是否能反 证它在体内时同样如此？也尚难肯定。从近年建立细胞系或株的过程说明，如果 永生性是体内肿瘤细胞所固有的，肿瘤细胞应易于培养。事实 上，多数肿瘤细胞初代培养时并不那么容易。生长增殖并不旺盛；经过纯化成单 一化瘤细胞后，也大多增殖若干代后，便出现类似二倍体细胞 培养中的停滞期。过此阶段后才获得永生性，顺利传代生长下去。从而说明体外 肿瘤细胞的永生性有可能是体外培养后获得的。从一些具有永 生性而无恶性性的细胞系，如NIH3T3 、Rat －1、10T1/2 等细胞证明，永生性和 恶性 （包括浸润性）是两种性状，受不同基因调控，但却有相 关性。可能永生性是细胞恶变的阶段。至少在体外是如此。 （四）浸润性 浸润性是肿瘤细胞扩张性增殖行为，培养癌细胞仍持有这种性状。在与正常组织 混合培养时，能浸润入其它组织细胞中，并有穿透人工隔膜 生长的能力。 （五）异质性 所有肿瘤都是由有增殖能力、遗传性、起源、周期状态等性状不同的细胞组成。 异质性构成同一肿瘤内细胞的活力有差别的瘤组织；处于瘤 体周边区的细胞获得血液供应多，增殖旺盛，中心区有的细胞衰老退化，有的处 于周期阻滞状态，那些呈活跃增殖状态的细胞称干细胞 （Stem Cells）、只有这些干细胞才是支持肿瘤生长的成分。肿瘤干细胞培养时易 于生长增殖；把干细胞分离出来的培养方法称干细胞培养。 （六）细胞遗传 大多数肿瘤细胞有遗传学改变，如失去二倍体核型、呈异倍体或多倍体等。肿瘤 细胞群常由多个细胞群组成，有干细胞系和数个亚系，并不 断进行着适应性演变。 （七）其它 肿瘤细胞在体外不易生长的原因可能由于：①依赖性：肿瘤细胞虽有较强克隆生 长力，但仍有一定的群体性或与其它细胞相依存关系。一是 肿瘤细胞与肿瘤细胞的相互依存，二是肿瘤细胞与基质成纤维细胞的依赖。体外 中国试剂网