母种培养基配制.docVIP

实验一 母种培养基的配制 一、目的要求： 1、了解母种培养基制作过程，理解灭菌原理； 2、掌握母种培养基的制备方法； 二、主要仪器设备及药品材料： 试管（若干个）、 刀 、砧板、天平、 电磁炉，铝锅、棉塞（或硅胶塞）、 纱布 、烧杯、 量筒 、马铃薯、 琼脂 、葡萄糖、高压灭菌锅 三、实验步骤与方法: 1 PDA培养基配方 马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升. 2. 母种培养基的配制 (1)熬制。马铃薯洗净，挖芽去皮。称取200克，切成玉米大小颗粒或薄片。量筒量取1000毫升水，铝锅中煮沸后记时30分钟。四层纱布过滤于量杯中。滤液倒入锅中文火加热，加入葡萄糖和琼脂，不断搅拌，直到琼脂溶化。补足水量至1000毫升。 （2）调节PH值。 (3)分装试管。将熬制的培养基用小漏斗趁热分装。培养基高度为试管长度的1/5左右，注意避免培养基沾于试管口外。分装完成后，盖紧硅胶塞。 （4）捆把。7支试管为一捆，用牛皮纸包裹试管口，用捆扎绳扎紧。贴上标签，准备灭菌。 （5）灭菌。注意加足水量和排气，灭菌完成后降压不能太快。 （6）摆斜面，培养基长度约为试管长度的1/2。斜面试管上覆盖洁净的厚毛巾或几层纱布，防止试管内产生过多的冷凝水。 2、胡萝卜马铃薯培养基配方 马铃薯20g，胡萝卜20g，琼脂20g，水1000ml 3、完全培养基配方 蛋白胨2g，葡糖糖20g，磷酸二氢钾0.