第三讲-免疫球蛋白-2018年.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * 抗体侧链学说： 、模板学说、 自然选择学说、网络学说 记忆：少量能与抗原表位特异性结合的克隆暂停分化，后者再次与抗原接触，即可快速成熟； 耐受：胚胎期接触相应抗原，此克隆被清除或抑制， 某些情况下，禁忌克隆可以复活或发生突变，成为能对自身成分产生应答的克隆。 较圆满解释了获得性免疫的三大特点——识别、记忆、耐受，极大推进了免疫学及分子遗传学的发展。单克隆抗体技术，从实践上提供了证据。 * 抗体侧链学说： 、模板学说、 自然选择学说、网络学说 记忆：少量能与抗原表位特异性结合的克隆暂停分化，后者再次与抗原接触，即可快速成熟； 耐受：胚胎期接触相应抗原，此克隆被清除或抑制， 某些情况下，禁忌克隆可以复活或发生突变，成为能对自身成分产生应答的克隆。 较圆满解释了获得性免疫的三大特点——识别、记忆、耐受，极大推进了免疫学及分子遗传学的发展。单克隆抗体技术，从实践上提供了证据。 * 974年，Jerne根据现代免疫学对抗体分子独特型的认识，在Burnet“克隆选择学说”的基础上提出了著名的免疫网络学说（immune network theory）该学说认，任何抗体分子或淋巴细胞的抗原受体上都存在着独特型，它们可被机体内另些淋巴细胞识别而刺激诱发产生抗独特型。以独特型同抗独待型的相互识别为基因，免疫系统内构成“网络”联系，在免疫调节中起重要作用。Jerne的网络学说强调了免疫系统是各细胞克隆之间相互联系、相互制约所构成的对立统一整体，是免疫学中的一重突破，它对于免疫学理论研究以及在生物学和医学领域中的实际应用都具有重大意义。由于Jerne对免疫学理论研究的贡献，他与外两位科学家一起分享了1984年的诺贝尔医学和生理学奖。 * * * * * * * * * * * * 抗体基因独特的神秘之处是其所编码蛋白的多样性。这种多样性表现在几个水平上。 最惊人的是这些分子的抗原结合部位的多样性 * * * * * 典型的免疫球蛋白单体是4条多肽链通过疏水作用而结合在一起，并由二硫链连接。 由于等位排斥，B淋巴细胞常表达一种重链和一种轻链多肽链，因此，完整的Ig蛋白是由两个约55KD相同重链和两个约25KD相同轻链构成。轻链和重链之间由1个或几个二硫链结合，同时也存在非共价作用，这样“半个抗体”包含单一抗原结合位点。 完全的含4个多肽链的单体通过两重链之间类似疏水作用形成，同时它也利用一个或几个二硫链接稳定其复合体。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 胚胎期某细胞克隆若接触相应抗原，此克隆即被清除或受抑制，称为禁闭克隆（forbidden clone）。 某些情况下，禁忌克隆复活或发生突变，成为对自身成分产生应答的克隆。 人工制备的抗体 多克隆抗体 单克隆抗体 基因工程抗体 多克隆抗体 (polyclonal antibody, pAb) 抗原免疫动物，获得抗血清 同一抗原的多个抗原表位； 即使是针对同一表位,可以产生不同类型的抗体。 多克隆抗体的产生 不同抗原表位可诱导多个B细胞克隆激活并产生不同特异性抗体 优点：制备容易、来源广泛 缺点：特异性不高，不易大规模制备 Y Y Y Y Y Y 伤寒甲 伤寒乙 将产生特定抗体的B细胞与能无限生长的骨髓瘤细胞融合，形成B细胞杂交瘤，由克隆化的B细胞杂交瘤产生的抗体。 单克隆抗体（monoclonal- antibody，mAb） 1975年，Milstein与 Kohler建立单克隆抗体制备技术，获得了1984年诺贝尔奖。 杂交瘤细胞筛选的基本原理 B细胞+ 骨髓瘤细胞 PEG B细胞 骨髓瘤细胞 B细胞杂交瘤 骨髓瘤细胞：TK或 HGPRT缺陷 HGPRT：次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 TK：胸苷激酶 HAT：含次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶核苷的培养基 特点 高度均一 特异性强 体外大规模制备与纯化 基因工程抗体 借助重组DNA及蛋白质工程技术，对编码抗体的基因进行加工改造，转染受体细胞，使其表达重组抗体分子。 基因工程抗体构建示意图 目的 降低鼠源抗体的异源性 改进抗体功能 规模化生产特异性抗体 第六节 免疫球蛋白的遗传控制 如何解释Ig V区中出现的不可估量的多样性? 抗体应答早期产生的免疫球蛋白主要为IgM, 再次应答主要为 IgG ，还会有IgA,IgE,IgD ,如何解释 ? 1976年Tonegawa (利根川进) 等证实： V区和C区编码的基因片段在胚系DNA中是分离的； 抗体轻链（重链）分别由V、（D）、J、C基因片段群中各选择一个基因片段组合而成； V、（D）