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一、甘油菌活化LB培养基制备：胰蛋白胨10g酵母提取物5gNaCl10g加去离子水至800mL搅拌，使溶质完全溶解，用5mol/LNaOH（约0.2ml）调节PH至7.4，加入去离子水至1000ml，高压蒸汽灭菌20min。灭菌后注意密封，4℃能存放1个月。含琼脂的LB培养基：上述液体培养基高压灭菌前加入15g/L（铺制平板用）或7g/L（配制顶层琼脂糖用）琼脂糖，高压灭菌20min。2.倒平板2.1 超净台，接种环，灭菌培养皿，酒精灯等紫外灭菌30min。2.2 培养基高压后放在60℃水浴锅中保温。溶液尚未冷却时，即应取出培养基，并轻轻转动以使溶解的琼脂或琼脂糖能均匀分布于整个培养基溶液中。
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