病原生物学课件第二十章 节 病毒感染的诊断与防治-0.pptVIP

疫苗接种 病毒增殖指标-显微镜检查inclusion body under microscope 第二十章 病毒感染的诊断与防治 第一节???病毒感染的诊断 基本程序 选择检测方法的基本原则 一、标本的采集与送检 第一节 病毒感染的诊断 基本原则同细菌，强调以下原则 1.分离病毒或检测病毒抗原 合适标本、早期取材、无菌操作、加“双抗”（PC/SM）杀菌、 50%甘油、盐水、保冷速送 2.病毒感染血清学诊断 早期血清特异性IgM抗体增高有诊断意义 IgG通常取急性期和恢复期双份血清，S2﹥S1 4倍以上有诊断意义 分离培养和鉴定病毒的常用方法 (一）动物接种 (二）鸡胚接种 (三）细胞培养 (四）病毒感染的鉴定 细胞形态改变 红细胞吸附 干扰现象 细胞液pH值改变 二、病毒的分离培养与鉴定 CPE 多核巨细胞 包涵体形成 （五）病毒感染的定量测定 空斑形成单位（Plaque forming unit，PFU） 一个空斑是由一个病毒复制形成的 故可计数病毒数量 也作为病毒毒力指标 50% 致死量（50% lethal dose,LD50）或 50%组织细胞感染量(50% tissue culture infection dose,TCID50) 估计所含病毒的感染量 三、病毒感染的血清学诊断 1.中和试验（ Neutralization test, NT test） 2.补体结合试验(Complement fixation test, CP test) 3.血凝试验与血凝抑制试验(Blood clotting test and blood clotting inhibition test, HI test) 4.免疫扩散试验 1.减毒活疫苗(attenuated lived vaccine) 来源 毒力变异－－减毒株、无毒株 天然菌株筛选－－弱毒株、无毒株 优点 模拟了自然感染过程 保留抗原的天然结构 活菌体起到天然载体作用 免疫力持久等 举例 麻疹、风疹、脊髓灰质炎等 潜在危险性 1.有可能回复为有毒力的病毒 现今极少发现 2.对免疫缺陷的机体可引起感染或并发症 3.可能活化人体内其它潜伏的病毒 4.可能引起持续感染 2.灭活(死)疫苗(inactivated vaccine) 是用物理、化学方法杀死病毒，但仍保持其抗原性的一种生物制剂 常用的病毒灭活疫苗有乙型脑炎、狂犬病、甲型H1N1流感等 灭活疫苗的缺点 1.需要培养大量病毒，成本较高 2.甲醛灭活的麻疹疫苗和呼吸道合胞疫苗可加重疾病，其机制不详 3.灭活疫苗不能诱发细胞毒性T细胞，却可激活TDTH细胞，引起迟发型超敏反应 4.免疫效果较差，维持时间短 3．亚单位疫苗 分离提取具有免疫功能的蛋白或 利用DNA重组表达这些蛋白、多肽或 合成肽制成的疫苗 4. 基因工程疫苗 制备 利用DNA重组技术定向缺失病毒基因的某一区段,使病毒丧失毒力，而保留增殖能力和免疫原性 特点 其遗传背景清楚、疫苗株不易返祖而恢复毒力，已用于研制HIV-1、脊髓灰质炎和甲型肝炎的活疫苗 5. 核酸疫苗 DNA or RNA基因片段+载体构成 优点：便于制备、储备嗯哼运输 可刺激细胞免疫和体液免疫 存在的问题 1.目的基因表达水平不高 2.刺激产生免疫反应较弱 3.安全性尚需观察 蛋白疫苗！ 疫苗名称 疫苗种类 培养细胞种类 脊髓灰质炎疫苗 减毒活疫苗 人二倍体，Vero细胞 麻疹疫苗 减毒活疫苗 鸡胚细胞 流行性腮腺炎疫苗 减毒活疫苗 鸡胚细胞 风疹疫苗 减毒活疫苗 人二倍体细胞 甲型肝炎疫苗 减毒活疫苗 人二倍体细胞 人用狂犬病疫苗 灭活疫苗 地鼠肾细胞 乙型脑炎疫苗 灭活疫苗 地鼠肾细胞 森林脑炎疫苗 灭活疫苗 地鼠肾细胞 乙型肝炎疫苗 基因工程疫苗 酵母菌表达 我国常用的病毒疫苗 （二）人工被动免疫 血清丙种球蛋白、胎盘球蛋白、转移因子等 血清丙种球蛋白（serum gammaglobulin） 是