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苜蓿花叶病毒RNA23′端cDNA 转基因烟草的研究

( ) 第 33 卷 第 4 期 内蒙古师范大学学报 自然科学 汉文 版 Vol. 33 No. 4 2004 年 12 月 Journal of Inner Mongolia Normal University (Natural Science Edition) Dec. 2004 苜蓿花叶病毒 RNA 3′端 cDNA 转基因烟草的研究 2 1 2 2 2 李  颖 , 哈斯阿古拉 , 方天祺 , 张鹤龄 ( 1. 内蒙古农业大学 生物工程学院 , 内蒙古 呼和浩特 010018 ; 2. 内蒙古大学 生命科学学院 , 内蒙古 呼和浩特 010021) ( ) 摘  要 : 将克隆的苜蓿花叶病毒中国分离株 AlMV - Ch RNA 3′端 cDNA 重组到植物表达载体 pROKII 中 , 用 2 ( ) LBA4404 ,采用叶圆片法转化普通烟草 ,诱导再生小植株. 经卡那 三亲融合法导入农杆菌 Agrobacterium tumefaciens 霉素抗性筛选和 PCR 检测 ,证明AlMV RNA 3′端基因已整合到转基因烟草的基因组 DNA 中. 2 关键词 : 苜蓿花叶病毒 ; RNA ; 三亲融合 ; 烟草 2 ( ) 中图分类号 : Q 939. 46   文献标识码 : A   文章编号 : 2004 ( ) 苜蓿花叶病毒 Alfalfa Mosaic Virus , AlMV 是苜蓿花叶病毒组的典型成员 ,该病毒通过汁液磨擦和多种 蚜虫以非持久方式传播[1 ] . AlMV 寄主范围广泛 ,可以侵染 51 科双子叶植物中的 430 多种 ,其中不少是重要 的经济作物 ,往往造成严重的病害[2 ] . AlMV 是具有多型性颗粒的正链 RNA 病毒 ,基因组包括 3 种 RNA 组分. 其中 RNA2 的全序列包含 2 593 个核苷酸 ,编码一个大的ORF ,起读密码 AUG 位于 5′端 55~57 个核苷酸处 ,2 370 个核苷酸为编码序列 ,编码由790 个氨基酸组成的分子量为 90KD 的复制酶 P 亚基 ,RNA 3′端非编码区 2 2 由 166 个核苷酸组成 ,其中包含了AlMV 基因

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