基质金属蛋白酶抑制剂gm6001 mmp29inhibitorⅰ mmp29inhibitorⅱ对人晶体上皮细胞移行的影响-effects of matrix metalloproteinase inhibitor gm 6001 mmp 29 inhibitor ⅰ mmp 29 inhibitor ⅱ on the migration of human crystalline epithelial cells.docx

基质金属蛋白酶抑制剂 GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ、MMP2/9InhibitorⅡ对人晶体上皮细胞移行的影响 摘要目 的 ：比较三组基质金属蛋白酶抑制剂 GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ和 MMP2/9InhibitorⅡ 对 人 晶 状 体 上 皮 细 胞（1ens epithelial cells，LECs)移 行 的 抑 制 效 果 以 及 对 细 胞 活 性 的 影 响 , 期 望 寻 找 出 一 种 能 安 全 有 效 预 防 后 囊 膜 混 浊 （ posterior capsular opacification，PCO）的 药 物 。方 法 ：体外培养 LECs，取传至 3-4 代的细胞培养于 6 孔板中，当细胞大部分融 70%合 后改用无血清培养基作用 12h，分别加入不同浓度（0.25，0.5，1，2，4，8，16，32， 64，128μmol/L）GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ和 MMP2/9InhibitorⅡ，以基础培养液 培养的细胞作对照组，用 200μl 无菌枪头在细胞层中划出一条两边平行的无细胞区， 继续培养 24h，计算每组细胞移行的平均距离及抑制率。在测定细胞活性时，取传至 第 2 代或第 3 代 LECs，把细胞密度调整为 5×105 个/ml，接种至 96 孔板，200μl/孔， 培 养 箱 中 常 规 培 养 24 h ， 分 别 加 入 128μmol/L 的 GM6001 、 64μmol/L 的 MMP2/9InhibitorⅠ和 32μmol/L 的 MMP2/9InhibitorⅡ，以基础培养液培养的细胞作对 照组，培养 24 h 后用 MTT 法测定吸光度(OD)值，分析细胞活性。结 果 ：（1）细胞生长状态良好，排列不规则，贴壁生长呈梭形或多边形。（2）细胞经 不同浓度的 GM6001、MMP2/9InhibitorⅠ和 MMP2/9InhibitorⅡ作用时均为随着浓度 的增大，移行距离逐渐减少，呈剂量依赖性，秩相关指数 rs 分别为 0.847、0.856 和 0.9016，均0.5。（2）MMP2/9InhibitorⅡ组细胞移行的平均距离明显低于其余三组：I对照组细胞移行的平均距离设为 1，当细胞经 32μmol/L 的三组抑制剂作用时，GM6001组 、 MMP2/9InhibitorⅠ 组 和 MMP2/9InhibitorⅡ 组 细 胞 移 行 的 平 均 距 离 分 别 为 ： 0.478±0.091、0.294±0.088 和 0.191±0.081，差异有统计学意义（F=116.031，P0.01）。（3）四组细胞的活性无明显差异，对照组、GM6001 组、MMP2/9InhibitorⅠ组和 MMP2/9InhibitorⅡ组的 OD 值分别为 0.607±0.0163、0.567±0.0151、0.583±0.0103 和 0.595±0.0138，总体差异无统计学意义（F=1.403，P0.05）。结 论 ：三 组 抑 制 剂 均 可 有 效 地 抑 制 制 LECs 的 移 行 ， 且 没 有 明 显 影 响 细 胞 的 活 性 。 其 中 ， MMP2/9InhibitorⅡ 的 抑 制 作 用 最 明 显 ， 可 能 为 临 床 上 药 物 预 防 后 囊 膜 混 浊 提 供 参 考 。关 键 词 ： 基 质 金 属 蛋 白 酶 抑 制 剂 ； GM6001 ； MMP2/9InhibitorⅠ ；MMP2/9InhibitorⅡ； 后 囊 膜 混 浊The effects of matrix metalloproteinase inhibitors of GM6001 、MMP2/9InhibitorⅠand MMP2/9InhibitorⅡ on migration of human lens epithelial cellsAbstractObjective:To determine whether metalloproteinase inhibitor can prevent the migration of human lens epithelial cells in search for the basis for clinical medication to prevent PCO following cataract surgery.Methods:LECs were cultured in vitro. The second or third generation of cells were incubated to 6-well plates. Then the c