第3章病毒lin.pptVIP

上海师范大学 * 第63页/共74页 上海师范大学 * 第64页/共74页 上海师范大学 * 第三节 病毒与实践 有害的方面： 噬菌体与发酵工业 有益的方面： 昆虫病毒用于生物防治 病毒在基因工程中的应用 第65页/共74页 上海师范大学 * 一、噬菌体与发酵工业 由于噬菌体的广泛分布，加之微生物的培养方法采用深层通气法后，罐内发酵液被噬菌体侵染的机会增多。使发酵剂在短时间内就可出现溶菌现象，进而出现不正常发酵，甚至停止发酵，造成严重损失。 1．抗生素发酵与噬菌体的污染 1947年使用灰色链霉菌发酵生产链霉素时，曾发生由于噬菌体感染而出现溶菌现象，菌体减少，培养液变黑，抗生素效价不上升。 2．食品工业的噬菌体污染 食品工业上采用乳酸菌、醋酸菌、棒状杆菌等进行发酵，生产各种不同的食品。如果生产过程中受到相应的噬菌体感染时，发酵作用就会减慢，甚至停止，不积累发酵产物，菌体很快消失，整个发酵生产就被破坏。 第66页/共74页 上海师范大学 * 二、昆虫病毒用于生物防治 主要采用一些病毒剂进行生物防治，专一性高；扩散性强；毒力大；具有环保作用。 但现阶段由于其杀虫速度慢，在野外易失活和杀虫范围小等缺点，还难以普及推广。 对人类的不利作用：经济昆虫(蜂、蚕)病毒病 第67页/共74页 上海师范大学 * 微生物与人类的关系越来越密切，除原核生物的质粒作为基因载体外，也可以把病毒改造成不同外源基因的优良载体。通过它们，可以把任何动物植物和微生物的目的基因导入合适的受体系统中，从而获得具有新性状的工程细胞和工程菌。 三、病毒在基因工程中的应用 第68页/共74页 上海师范大学 * （一）噬菌体作为原核生物基因工程的载体 噬菌体作为载体有以下优点： 遗传背景清楚； 载有外源基因时，仍可与宿主的核染色 体整合并同步复制； 宿主范围狭窄，使用安全； 感染率极高； 大肠杆菌噬菌体：是一种含线状dsDNA的温和噬菌体，在其基因组中，约有一半是对自身生命活动必要的必要基因，另一半是非必要基因，因此可被外源基因取代而建成良好的基因工程载体。 第69页/共74页 上海师范大学 * 细菌的鉴定和分型由于噬菌体的作用具有高度特异性，即一种噬菌体只能裂解和它相应的细菌，因此可用于细菌的鉴定。而且噬菌体的这种作用除具有种的特异性外，还具有型的特异性。一种噬菌体只能作用于该种细菌的某一型。于是可利用某一特定的噬菌体，对细菌进行分型鉴定。 噬菌体在其它方面的应用 第70页/共74页 上海师范大学 * 诊断和治疗疾病噬菌体感染相应的细菌后，在适宜培养条件下，能迅速繁殖，产生大量噬菌体的子代。利用这一特性可将已知噬菌体加入被检材料中共同孵育，如果出现噬菌体效价增长，就证实材料中有相应的细菌存在。在疾病治疗中也可以使用噬菌体来裂解细菌，特别是在治疗某些创伤感染时，由于多数细菌对多种抗生素都产生了耐药性，在药物治疗效果不佳的情况下，最有效的办法就是采用相应噬菌体来治疗。现利用葡萄菌、链球菌、尤其是绿脓杆菌的噬菌体用于治疗已取得了良好的效果。 第71页/共74页 上海师范大学 * （二）动物DNA病毒作为动物基因工程的载体 猴病毒40：一种寄生在猴细胞中的DNA病毒，能使试验动物致癌。其生活周期包括引起宿主细胞裂解和转化成癌细胞两个阶段。SV-DNA是一个复制子，当侵染其宿主细胞后，既能自我复制，也能整合在宿主的染色体上。 （三）植物DNA病毒作为植物基因工程的载体 花椰菜花叶病毒：一种由昆虫传播的侵染十字花科植物病毒，含8kb的环状dsDNA，存在多种限制性内切酶的切点。在其非必要基因区插入外源DNA后，所形成的重组体仍具侵染性。 但也存在缺点：不能与宿主核基因组发生整合，因此还无法获得遗传性稳定的转基因植株。 第72页/共74页 上海师范大学 * （四）昆虫DNA病毒作为真核生物基因工程的载体 杆状病毒：在昆虫中具有广泛的宿主，病毒体呈杆状，外有被膜，含有环状dsDNA。 杆状病毒作为外源基因载体有以下优点： 具有在宿主细胞核内复制的cccDNA（共价闭环DNA）； 不侵染脊椎动物，对人畜十分安全； 核型多角体蛋白基因是病毒的非必要基因区，它带有强启动子，可使此基因表达产物达到宿主细胞总蛋白量的20%； 可作为重组病毒的选择性标记，原因是外源DNA的插入并不影响病毒的繁殖，却丧失了形成多角体的能力； 对外源基因有很大容量； 有强启动子作病毒的晚期启动子； 第73页/共74页 病毒与细胞生物的主要区别是什么? 什么是烈性噬菌体?简述其裂解性生活史. 什么是一步生长曲线?它可分几期?各时期有何特点? 第74页/共74页 * * * * * * * 上海师范大学 * 5、裂解（释放） 多数噬菌体以裂解方式释放