2012届高三一轮复习生物：实验21 同位素标记法的实验应用课件.pptVIP

实验设计专题研究系列之(二十一) 同位素标记法的实验应用 实验专项 1．概述 用同位素标记化合物，让它们一起运动、迁移，再用探测仪器进行追踪，可以明白化学反应的详细过程的方法。 2．方法应用 用来研究细胞内的元素或化合物的来源、组成、分布和去向等，进而了解细胞的结构和功能、化学物质的变化、反应机理等。 3．应用分析 (1)标记某元素，追踪其转移途径。如用18O标记H218O，光合作用只产生18O2；再用18O标记C18O2，光合作用只产生O2；证明光合作用产生的氧气中的氧原子全部来自于H2O，而不是来自CO2。 (2)标记特征元素，探究化合物的作用，如T2噬菌体侵染细菌的实验中，用32P标记噬菌体的DNA，大肠杆菌内发现放射性物质；35S标记蛋白质，大肠杆菌内未发现放射性物质；证明了DNA是噬菌体的遗传物质。 (3)标记特征化合物，探究详细生理过程，研究生物学原理。如用3H标记胸腺嘧啶脱氧核苷酸，研究有丝分裂过程中染色体的变化规律；用15N标记DNA，证明了DNA复制的特点是半保留复制。 【典例示范】 (2010·北京理综)科学家以大肠杆菌为实验对象，运用同位素示踪技术及密度梯度离心方法进行了DNA复制方式的探索实验，实验内容及结果见下表： 组别 1组 2组 3组 4组 培养液中唯一氮源 14NH4Cl 15NH4Cl 14NH4Cl 14NH4Cl 繁殖代数 多代 多代 一代 两代 培养产物 A B B的子Ⅰ代 B的子Ⅱ代 操作 提取DNA并离心 离心结果 仅为轻带(14N/14N) 仅为重带(15N/15N) 仅为中带(15N/14N) 1/2轻带(14N/14N) 1/2中带(15N/14N) 请分析并回答： (1)要得到DNA中的N全部被放射性标记的大肠杆菌B，必须经过____________代培养，且培养液中的____________是唯一氮源。 (2)综合分析本实验的DNA离心结果，第____________组结果对得到结论起到了关键作用，但需把它与第____________组和第____________组的结果进行比较，才能说明DNA分子的复制方式是____________。 (3)分析讨论： ①若子Ⅰ代DNA的离心结果为“轻”和“重”两条密度带，则“重带”DNA来自于____________，据此可判断DNA分子的复制方式不是____________复制。 ②若将子Ⅰ代DNA双链分开后再离心，其结果____________(选填“能”或“不能”)判断DNA的复制方式。 ③若在同等条件下将子Ⅱ代继续培养，子n代DNA离心的结果是：密度带的数量和位置________，放射性强度发生变化的是________带。 ④若某次实验的结果中，子Ⅰ代DNA的“中带”比以往实验结果的“中带”略宽，可能的原因是新合成DNA单链中的N尚有少部分为____________。 思路分析：(1)DNA是半保留复制，若要DNA中的N全部为15N，须在15N培养基中多代培养。 (2)第3组中双链为15N的DNA(B)在14N原料中复制1次，子代DNA中一条链为14N，一条链为15N，说明DNA为半保留复制。 (3)Ⅰ代DNA离心后仅为中带，说明为半保留复制，否则不能说明。若将Ⅰ代DNA双链分开后离心，会出现轻带和重带，不能判断DNA的复制方式。若将子Ⅱ代继续培养，得到的子代DNA仍是14N/15N、14N/14N，密度带的数量和位置不变，双链都是14N的DNA分子(14N/14N)增多，14N/15N DNA分子数不变。若子Ⅰ代DNA“中带”略宽，可能是新合成的链中有少部分15N所致。 答案：(1)多　15N/15NH4Cl (2) 3　1　2　半保留复制 (3)①B　半保留　②不能　③没有变化　轻　④15N 演 示 文 稿 1 2 3 后 等 , /10008/极品全能学生最新章节 当圵夻 【实战演练】 (2010·吉林4月质检)结合遗传物质的相关实验，回答下列问题： (1)艾弗里及其同事进行肺炎双球菌转化实验的一部分图解，该实验成功的最关键的实验设计思路是______________________________。 (2)上述实验证明了______________________________。 (3)后来，赫尔希和蔡斯用____________方法，进一步表明DNA才是真正的遗传物质。实验包括4个步骤： ①噬菌体与大肠杆菌混合培养；②35S和32P分别标记噬菌体；③放射性检测；④离心分离。 该实验步骤的正确顺序是____________(用数字表示)。 (