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试管稀释法药敏试 禽类实验室诊断技术 知识课件.ppt
试管稀释法药敏试验 一、原理 将药物作倍比稀释，观察不同含量的药物对细菌的抑菌能力，能够抑制培养基内细菌生长的最小药物浓度，称为最小抑菌浓度（MIC）。根据MIC的大小判断细菌对药物的敏感性，常用于测定抗菌药物及中草药对细菌的抑菌能力。 二、材料 菌悬液、营养肉汤培养基、抗菌药物、灭菌小试管、灭菌吸管、酒精灯、记号笔、超洁净工作台、电热恒温培养箱等。 三、试验前准备 1. 配制受试药液 用适宜的稀释液，将受试药品稀释成适当浓度的溶液，分装于灭菌干燥小瓶中，标明药物的名称、浓度、配制日期，于4℃保存。 2. 制备菌悬液 将保存的试验菌接种于营养肉汤培养液中，37℃恒温培养12~18h，进行活菌计数，使用时用肉汤培养液按一定比例稀释至浓度为1×108~2×108CFU/ml.。 常用抗菌药物原液的配制 青霉素G: pH6.0磷酸盐缓冲液 1280IU/mL 半合成青霉素 : pH6.0磷酸盐缓冲液 1280μg /mL 头孢： pH6.0磷酸盐缓冲液 1280μg /mL 氨基糖苷类： pH7.8磷酸盐缓冲液 1280μg /mL 四环素类：pH4.5磷酸盐缓冲液 1280μg /mL 甲氧苄啶 ：先用0.1mol/L乳酸溶解，再用蒸馏水稀释 磺胺、喹诺酮类：先用0.1mol/L氢氧化钠溶解，再用蒸馏水稀释
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