小麦植株再生体系的建立及面包品质基因的遗传操作论文论文.docVIP

中文摘要 中文摘要　 作为世界上最重要的粮食作物之一，小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ　ａｅｓｔｉｖｕｍ　Ｌ．）生产对 世界经济发展与人类生存都有着非常重要的作用，提高小麦面包烘烤品质是目 前我国面临的重大课题之一。新疆作为我国重要的粮食基地，小麦基因工程研 究尚处于初级阶段，所引进的优质小麦品种难以适应新疆特有生态环境，因此 针对新疆本地小麦的生长特性，建立一套遗传转化及育种技术体系，对改良新 疆及我国小麦品质具重要意义。　 论文首先以新疆目前主栽部分小麦品种为材料，采用细胞操作技术筛选植 株再生能力强的外植体材料；应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术确证其高分子量麦谷蛋白亚基 （ＨＭＷ－ＧＳ）组成；记录分析不同品种农艺性状。结果表明，所检测的材料中， 新冬１８幼穗和新冬１７幼胚为具较强再生能力的材料；主栽品种ＨＭＷ－ＧＳ等位基因 变异类型及亚基组合类型分别为１４种和１７种，品质平均得分为６．３分；不同品系 间各项生理指标均存在显著差异。初步确定了以新疆主栽小麦幼穗、幼胚为外 植体的小麦组织培养再生体系并确证了新疆目前主栽小麦品种的品质优劣和生 长特性。　 其次，以分别含有１Ｄｘ５、１Ａｘ１基因的转面包烘烤品质基因小麦后代为材料， 研究了在新疆种植后代ＨＭＷ－ＧＳ突变类型、外源基因的遗传稳定性及环境生长效 应。结果表明，分别随机挑选的１０００粒Ｔ７代转基因小麦种子中Ｂ７２－８－１１ｂ共出现 ２１类突变类型，Ｂ１０２－１－２共出现１１类突变类型；测定的Ｂ７２－８－１１ｂ和Ｂ７３－６－１连 续三代中，均检测到外源１Ｄｘ５基因的存在，且１Ｄｘ５基因均得到表达；Ｂ７２－８－１１ｂ 和Ｂ７３－６－１在实验地种植与新疆本地小麦比较，除穂长和剑叶长外均存在显著差 异。初步确定了转面包烘烤品质基因小麦后代在新疆种植外源基因的遗传稳定 性和环境适应性。　 最后，以新疆盐碱地主栽小麦品系为受体材料，采用现代分子生物学技术 获得面包烘烤品质主效基因１Ｄｘ５“清洁”载体，利用花粉管通道法进行了转化 研究，应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术进行胚乳特异性表达的检测。结果显示，转化当代收 获种子中检测到外源基因的表达，转化表达率为０．６５％，与转环形完整质粒比较 （转化表达率为０．２１％）转化表达率明显高；基因的表达表现出低拷贝数。证明 了花粉管通道法对新疆小麦进行面包烘烤品质基因“清洁”载体转化的可行性。　 　 关键词：小麦；组织培养；高分子量麦谷蛋白亚基；花粉管通道转化法；后代 分析　 I Abstract The wheat(Triticum aestivum L.)is one of the most important cereals in the world and it plays an important roles in the world economic development and human survives. How to improve wheat bread- making quality is the most important problems facing our country. The study of Xinjiang wheat genetic engineering is still in the initial stage and the introduced high quality wheat varieties is hard to be suited for Xinjiang unique environment. So that according to Xinjiang wheat growth features to establish a set of genetic transformation technical system is very important to improve Xinjiang wheat quality. The main work, results and conclusions of these studies are as follows. In this paper, Xinjiang main wheat varieties was taked as the experimental material firstly.The cell manipulation technique was applied to choose the high regeneration capacity wheat varieties,while the technique of SDSwas used to detect the HMW-GS composition in Xinjiang