沉默bcl-2基因对a549细胞凋亡影响.pdfVIP

中文摘要 沉默BCL．2基因对A549细胞凋亡的影响 摘 要 目的：评价RNA干扰(IⅢA 。对人非小细胞肺癌A549细胞中Bcl．2mRNA和蛋白水平的 表达的抑制作用；Bcl．2基因沉默对A549细胞增殖活性的影 响；探讨Bcl．2基因沉默导致A549细胞发生凋亡的作用。 方法：利用RNA干扰技术，通过向人非小细胞肺癌A549 mRNA Blot的方法测定转染siRNA表达质粒48hr后Bcl．2 表达水平和蛋白表达水平以及bak和baxmRNA表达水平； 活性的影响；使用流式细胞仪观察转染shBcl．2后A549细胞 凋亡情况。 表达水平和蛋白表达水平分别下降了71％和70％，同时BAK A549细胞可能发生了凋亡；应用MTT法检测不同剂量的 siRNA表达对A549细胞增殖活性的影响时发现，随着时间 的延长和计量的加大，A549细胞的增殖活性受到显著地抑 制；流式细胞仪结果显示转染shBcl．2后A549的早期凋亡细 胞占34％，坏死细胞占21％。 结论：bcl．2家族成员之间相互拮抗的关系，并且由此产 和bak在细胞凋亡中起着非常关键的作用)，为治疗肿瘤细 中文摘要 胞提供了一条新的途径。 关键词：bcl．2；细胞凋亡；RNA干扰 英文摘要 Effectof bcl-·2 onA549cell silencinggene apoptosis ABSTRACT ectiveToevaluatethelnhibitedeffectsofRNA obj bcl-2 on of interference(RNAi)一mediatedsilencing expression bcl一2mRNAand ofA549 the cells；to protein explore effectsofblc-2 on and suppressive genesilencingproliferation of tumorcell． apoptosis Method：IntroducesiRNA vectorintoA549cell expression ofhuman nonsmall cell cancerRNAinterference lung by measure level ofbcl一2 technology,and mRNA， expression andbakaftertransfectionofsiRNA protein，bax