环孢素a增强三氧化二砷you导的胶质瘤细胞u87-mg自噬性死亡.docVIP

环孢素 Ａ 增强三氧化二砷诱导的胶质瘤细胞 Ｕ８７－ＭＧ 自噬性死亡　 　 摘　要　 　 三氧化二砷（ Arsenic trioxide, ATO）可用于急性早幼粒细胞白血病 (Acute promyelocytic leukemia, APL)的治疗，对于其在实体瘤中的应用研究 也是当前的热点之一。ATO 导致细胞死亡的机理一方面是通过 caspase 3 途 径引起细胞凋亡，另一方面是引起细胞自噬性死亡。有报道指出，在实体 瘤—脑胶质瘤细胞中，ATO 引起的是自噬性死亡，而不是凋亡。 环孢素 A（Cyclosporine A, CSA）可以引起细胞的凋亡和细胞周期的停 滞，并被报道作为多种药物的增敏试剂使用，比如其可以增敏秋水仙碱、 紫衫醇等药物引起的细胞凋亡。但是，目前仍没有 CSA 可增强细胞自噬性 死亡的报道。 本研究的目的在于揭示：CSA 对于胶质瘤细胞 U87-MG 中 ATO 引起的 自噬性细胞死亡是否有增强作用。这一研究将有利于 ATO 在实体瘤治疗中 进一步降低其用药浓度从而降低其毒性。我们的研究结果显示，低剂量的 CSA（2?M）与 ATO（2?M）共同作用于 U87-MG，可以显著增加细胞的 死亡。细胞周期分析显示：CSA 与 ATO 联合作用，显著增加了细胞在 G2/M 期的停滞和 sub-G1 期细胞的分布；同时也显著增加了 AVO（acidic vesicular organelle）的形成与自噬相关蛋白 Beclin-1 的表达。我们的结论是：CSA 可 以增加 U87-MG 中 ATO 引起的自噬性细胞死亡。这一发现对于 ATO 在实 体瘤中的应用提出了新的解决方案。 关键词：自噬，三氧化二砷，环孢素 A，U87-MG CYCLOSPORINE A ENHANCES ARSENIC TRIOXIDE-INDUCED AUTOPHAGIC CELL DEATH IN MALIGNANT GLIOMA U87-MG CELLS 　 　 　 ABSTRACT Recent studies showed that arsenic trioxide (ATO) provided a novel approach to treat human acute promyelocytic leukemia (APL), multiple myeloma cells, androgen- independent prostate cancer, and hepatocellular carcinoma. Many investigations were done to explore the mechanism of ATO- induced cell death. ATO has been reported to induce apoptosis in APL cell lines, neuroblastoma cell lines, multiple myeloma cell and human gastric cancer cells through the activation of caspase 3. However, in malignant glioma cells, ATO induced autophagic cell death in stead of apoptosis, suggesting that ATO might be a novel pro-autophagic agent in treatment for malignant gliomas. Cyclosporine A (CSA), which is widely used in organ transplantation and in the treatment of autoimmune disorders, could induce growth arrest and/or apoptosis a wide spectrum of transformed cells, including rodent and human glioma cells. Many reports showed that CSA as a synergistic agent can enhance drug- induced apoptosis. Such as colchicine- induced apoptosis in rat cerebellar granule neurons, docetaxel- induced apoptosis in human gastric carcinoma cells, arsenic tri