(仪器分析课件）10.5 高效液相色谱分析基本方法的建立及定性定量基本方法.ppt

仪器分析教程 第10章 高效液相色谱法 10.5 高效液相色谱分析方法的建立及分析方法 High Performance Liquid Chromatography （HPLC) 10.5.1 HPLC分析方法的建立 10.5.2 HPLC定性定量方法 10.5 HPLC分析方法的建立及分析方法 10.5.1 HPLC分析方法的建立 1.了解样品信息和分析目的 样品的大体组成、浓度范围、组分的物理性质和紫外光谱图及分析目的。 2 .样品预处理 称重、稀释；液液萃取、液固萃取、提取，蒸馏等 10.5 HPLC分析方法的建立及分析方法 10.5.1 HPLC分析方法的建立 3.选择合适的分析方法 原则：一般根据试样的相对分子质量大小，溶解度及分子结构等进行分离方法初步选择。 10.5 HPLC分析方法的建立及分析方法 10.5.1 HPLC分析方法的建立 4.样品的检测 根据被测化合物性质选择适当的检测器。 如：紫外检测器一般检测含有共轭不饱和键的化合物。 5.HPLC的注意事项 ①流动相要清洁；②应对样品进行净化预处理；③样品 进样量适当；④控制好pH值范围（一般2-8）；⑤选择适 当的缓冲溶液；⑥控制好系统的压力（一般＜15Mpa); ⑦经常清洗色谱柱。 10.5 HPLC分析方法的建立及分析方法 10.5.2 HPLC定性定量方法 1.HPLC定性方法 ①GC的定性方法基本上都可用于HPLC ②利用HPLC检测器的选择性进行定性 ③利用反相色谱中的“a，C”指数定性 反相色谱中有机调节剂的浓度c与待测组分的分配比k之间满足对数 线性关系，可表示为： 某一组分的a，C指数与某已知标样相同，即可认定两者为同一种化合物