ii hladr蛋白在潮汕食管癌组织中的表达及意义-expression and significance of ii h ladr protein in chaoshan esophageal carcinoma tissue.docx
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ii hladr蛋白在潮汕食管癌组织中的表达及意义-expression and significance of ii h ladr protein in chaoshan esophageal carcinoma tissue
摘要背景与目的食管癌是我国高发的恶性肿瘤之一。机体抗肿瘤免疫是治疗食管癌理想的策略之一。特别是CD4+T细胞介导的抗肿瘤免疫是近年来的研究热点。Ii链是MHCII类分子的分子伴侣,抑制MHCII类分子结合内源性抗原,协助MHCII类分子呈递外源性抗原给CD4+T细胞。肿瘤细胞中高表达Ii可能会阻止MHCII类分子提呈内源性肿瘤相关抗原,从而减弱肿瘤的免疫原性。HLA-DR是MHCII类分子中的重要角色,在抗肿瘤免疫反应中起重要作用,二者在肿瘤细胞中表达状况的研究,可能为研究食管癌提供一个新的思路。本实验拟采用免疫组化及SIMPLE同部位标记和消除抗体法,检测这两种免疫相关蛋白在食管癌及癌变不同发展阶段组织中的表达情况,从肿瘤免疫角度探讨其与食管癌的关系。材料与方法1.研究对象:1)收集2008-2009年汕头大学医学院肿瘤医院送检病理学教研室食管癌手术标本及配对的癌旁、远离癌旁的切缘组织各144例,所有肿瘤病理组织学类型均为鳞状细胞癌。按组织学分级:其中I级36例,II级81例,III级27例。2)另取本课题组收集的确诊的癌旁粘膜低级别上皮内瘤变5例,高级别上皮内瘤变10例与以上癌旁组织合并分类。3)取本科室法医病理尸检正常食管组织5例作为正常对照,以及自身免疫性桥本氏甲状腺炎10例作为免疫性疾病对照,食管贲门未分化癌5例作为食管鳞癌对照。2.HE染色光镜下按WHO2003年食管癌病理组织学分型标准确定病理类型。免疫组织化学染色采用EnvisionLabelledPeroxidaseSystem(ELPS)二步法检测石蜡组织切片中Ii、HLA-DR蛋白的表达。利用LeicaDMRXA2全能显微镜与LeicaIM50图像采集系统拍照,每张切片在400倍镜下随机选取5个视野采集图片。利用Image-ProPlus6.0图像分析系统计算阳性细胞数。4.SIMPLE染色采用SIMPLE方法检测石蜡组织切片中Ii及HLA-DR的共表达情况,利用全自动生物显微镜扫描,选取相同部位的图片进行对比分析。结果1.Ii在正常食管上皮及低级别上皮内瘤变中不表达,在高级别上皮内瘤变和进展期鳞癌中表达增加。各组间两两比较发现,正常粘膜、低级别、高级别上皮内瘤变分别与食管癌比较差别有高度统计学意义(P<0.01)。正常食管上皮与高级别上皮内瘤变组比较,差别有统计学意义(P<0.05),低级别与高级别上皮内瘤变比较,差别没有统计学意义(P>0.05)。食管鳞癌随着分化程度的降低,Ii的表达率逐渐增加(P<0.05)。2.HLA-DR蛋白在正常食管上皮组织不表达,低级别上皮内瘤变中微量表达,在高级别上皮内瘤变和食管鳞癌中表达增加。正常组与低级别上皮内瘤变比较,高级别上皮内瘤变与食管鳞癌比较,差别均没有统计学意义(P>0.05)、但正常上皮、低级别上皮内瘤变组均分别与高级别上皮内瘤变、食管鳞癌比较,差别均有高度统计学意义(P<0.01)。3.食管鳞癌中Ii与HLA-DR蛋白在肿瘤细胞中的表达呈正相关,(P<0.05,rs=0.358),SIMPLE同部位标记和消除抗体法进一步验证了二者在肿瘤局部区域存在共表达。4.高分化的食管鳞癌中TIL数目较低分化组增多。(P<0.05)。结论1.Ii蛋白在食管正常粘膜和低级别上皮内瘤变组织不表达、HLA-DR蛋白在后者中偶见表达,二者在食管高级别上皮内瘤变和鳞癌中均表达,且Ii和HLA-DR蛋白的表达呈正相关。提示二者在食管鳞癌肿瘤免疫中存在共同调节机制。2.Ii蛋白在低分化的食管癌组织中表达较高。3.采用SIMPLE同部位标记和消除抗体法验证发现食管鳞癌细胞中Ii和HLA-DR共表达。4.高分化的食管鳞癌中浸润的TIL较多,低分化的食管鳞癌中浸润的TIL少。关键词Ii;HLA-DR;食管鳞癌AbstractBackgroundandobjectiveAreportplacedesophaguscarcinomaasoneofthemostcommoncancerinChina.Theantitumortheropyisanidealstrategy,especiallyantitumorimmunityreactionmediatedbyCD4+Tcellisahottopic.TheinvariantchainisamolecularchaperoneofclassIImolecules.ItplaysanimportantroleintheprocessofbindingclassIItopresentexogenousantigenswhichpreventthebindingofendogenousantigens.IncreasedIimayinhibitbindingendogenoustumourantig
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