雷公藤内酯醇与5-triptolide and 5.docx

3目录英文缩略词表………………………………………………………………………4中文摘要……………………………………………………………………………5英文摘要……………………………………………………………………………7前言…………………………………………………………………………………9第一部分雷公藤内酯醇与5-氟尿嘧啶联合对人结肠癌SW620细胞的体外抗肿瘤作用……………………………………………………………………………11第二部分雷公藤内酯醇与5-氟尿嘧啶联合对人结肠癌SW620细胞裸鼠移植瘤作用的研究…………………………………………………………………………30全文结论……………………………………………………………………………40参考文献……………………………………………………………………………41致谢…………………………………………………………………………………45综述…………………………………………………………………………………464英文缩略词表英文缩写英文全称中文名称BaxBcl-2AssociatedXProteinbcl-2相关X蛋白Bcl-2Bcelllymphoma/leukemia-2B细胞淋巴瘤/白血病-2基因FBSfetalbovineserum胎牛血清FCMFIOWCytometry流式细胞仪HSP70Heatshockprotein70热休克蛋白70IC5050%InhibitionConcentration50%抑制浓度SPSSStatisticalpackagefor科学统计软件包TPLthesocialsciencesTritolide雷公藤内酯醇PBSPhosphatcBufferSaline磷酸盐缓冲生理盐水5-FuFluorouracil5-氟尿嘧啶WBwesternblot蛋白印迹实验（westernblotassay）5雷公藤内酯醇与5-氟尿嘧啶联合对人结肠癌细胞株SW620体内外抗肿瘤作用的研究中文摘要目的研究雷公藤内酯醇与5-氟尿嘧啶联合的体内外抗肿瘤作用及其作用机制。方法以CCK-8法检测不同浓度的雷公藤内酯醇（TPL）及5-氟尿嘧啶(5-Fu)单独或联合应用对结肠癌SW620细胞的增殖抑制作用；流式细胞术检测药物对细胞凋亡及细胞周期的变化；免疫印迹法（westernblot）检测药物对细胞中热休克蛋白70（Hsp70）、bcl-2及bax蛋白表达的影响；通过建立结肠癌SW620细胞裸鼠移植瘤模型，观察TPL与5-Fu联合应用的体内抗肿瘤作用；Westernblot检测肿瘤组织中Hsp70、bcl-2、bax蛋白的表达情况。结果CCK-8结果显示不同浓度的TPL、5-Fu可明显抑制SW620细胞的生长，而且这种抑制作用具有时间和剂量依赖性；TPL3.75ng/ml与5-Fu2.5μg/ml联合应用对SW620细胞的抑制效果均明显优于单独应用TPL或5-Fu组（P0.01）。药物作用于SW620细胞48h后，联合用药组TPL3.75ng/ml+5-Fu2.5μg/ml、单用TPL3.75ng/ml组或5-Fu2.5μg/ml组均表现为G1期细胞比例上升，S期细胞比例下降，这种变化以联合用药组为较明显;联合用药组细胞凋亡率为10.36%，高于对照组及TPL、5-Fu单独应用组。TPL尾静脉注射对结肠癌SW620细胞裸鼠移植瘤有较强的抑制作用，0.4mg/kgTPL对移植瘤的抑制率为53.73%（P＜0.01）；以TPL0.1mg/kg联合5-Fu10mg/kg治疗荷瘤裸鼠后，肿瘤抑制率达67.96%，效果优于单药组。体外实验中，westernblot结果显示5-Fu2.5μg/ml组、TPL3.75ng/ml组、联合用药TPL3.75ng/ml+5-Fu2.5μg/ml组的Hsp70蛋白表达量均较对照组下降，联合用药组较单药组下降为更明显，差异均有统计学意义（P﹤0.05）；5-Fu组、TPL组、联合用药组的bcl-2蛋白表达量均较对照组下降（P﹤0.05）；bax蛋白表达量较对照组均有增加（P﹤0.05），联合用药组bax蛋白表达量较5-Fu组增高（P﹤0.05），联合用药组较TPL组虽有增高，但差异无明显统计学意义（P﹥0.05）。移植瘤组织的westernblot结果显示：5-Fu10mg/kg组、TPL0.1mg/kg组、联合用药组TPL0.1mg/kg+5-Fu10mg/kg的Hsp70蛋白表达量均较对照组下降，联合用药组较单药组下降为更明显，差异6均有统计学意义（P﹤0.05）；bcl-2蛋白表达量较对照组下降（P﹤0.05），联合用药组较单药组下降（P﹤0.05）；TPL组、联合用药组中bax蛋白表达量较对照组增加（P﹤0.05），联合用药组较单药组增加（P﹤0.05），5-Fu