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相关知识 什么是MGB探针 MGB探针的优点 提高Tm 探针更短 提高配对与非配对模板间Tm的差异 提高信噪比 淬灭基团为无荧光基团, 与reporter基团空间距离 更近,有更好的淬灭效果 使杂交的稳定性增加 如何防止模板污染 相关厂家 Artus: 成套试剂盒 QIAGEN-Operon: 合成定量引物，探针 Biosearch: 合成定量引物，探针 QIAGEN: 预合成的探针引物 QIAGEN: 定量PCR试剂盒，（探针法，染料法） Epicentre: 定量PCR试剂盒， （染料法） Clontech: 定量PCR试剂盒，(探针法) Abgene: 定量PCR试剂盒，（探针法，染料法） Artus 探针合成 QIAGEN OPERON BioSearch 客户给出序列，我们合成，不提供设计服务。 预合成的探针引物 QIAGEN ---- MGB探针 试剂盒 QIAGEN: 定量PCR试剂盒，（探针法，染料法） Epicentre: 定量PCR试剂盒， （染料法） Clontech: 定量PCR试剂盒，(探针法) Abgene: 定量PCR试剂盒，（探针法，染料法） QIAGEN QuantiTect SYBR Green PCR/RT-PCR Kit 29.86 RMB / run QuantiTect Probe PCR /RT-PCR Kit 37.45 RMB / run 不包含UNG酶/ 包含ROX/ 热启动酶，（化学修饰型）/含 dUTP 优点： 特异性好，灵敏度高，结果稳定，无需优化 QIAGEN QuantiTect Multiplex PCR Kit? 多重定量即在同一反应管内同时对多个目标基因进行定量，可以大大提高精度并节约成本。 节约成本---- 节省试剂，节省样本，节省时间。 提高精度---- 避免加样误差和反应间误差。 QIAGEN QuantiTect Multiplex PCR Kit? 无需优化 – 试剂和操作步骤都经过了预先优化 高灵敏度 – 可检测到10copy的目标序列 定量准确可靠 – 目标基因和参照基因在一个反映体系中扩增，消除了加样误差和反应间误差导致的结果误差 操作简单 – 预制好的master mixes可以和各种定量PCR以配套使用 QIAGEN QuantiTect Multiplex PCR Kit? QIAGEN QuantiTect Multiplex PCR Kit? 应用： 基因表达研究 基因型分析---- GMO. 微生物鉴定 芯片，RNAi后期验证 试剂盒里面带有ROX,最多作3个基因 204543（200） -??RMB8,855? 204545 （1000） -??RMB35,395 Cost: 35.4-44.3RMB/Run -------如果一次做3个基因, 则每个基因只需11.8-14.8RMB QIAGEN QuantiTect Multiplex PCR Kit? 竞争 Homemade :效果差,需要许多的优化工作. Stratagene :brilliant multiplex qPCR master mix 专为 Mx3000，MX4000设计 Abgene ABsolute? QPCR SYBR? Green Mix 27.06-28.34 RMB / run ABsolute? QPCR Mix 19.4-23.0 RMB / run 不包含UNG酶/ 热启动酶 Epicentre FailSafe Real-Time PCR PreMix Selection Kit FailSafe Real-Time PCR System 200 Rxns - Plus 2 PreMixes 28.75/run 包含ROX/不含有dUTP/不包含UNG酶 优点： 确保对不同的反应都有最好的试验结果 弱点： 先做预试验，选出合适的PreMixes，在进行正式试验，操作比较麻烦。premix里面包含了ROX和PCR enhancer Clontech BD QZyme? Assay BD QTaq? DNA Polymerase Mix Clontech BD QZyme? Assay----- 638137 200rxns 2750RMB 50X BD QZyme Gene-Spe