第五章 酶工程制药工艺技术知识基础1.pptVIP

生 物 制 药 工 艺 学 主 讲 胡国勤 郑 州 大 学 化 工 学 院 酶工程技术 酶的性质与特性 固定化酶及其特性 第五章 酶工程制药工艺技术基础 L-天冬氨酸生产工艺 酶工程技术 酶工程是酶学与工程学相互渗透结合，发展形成的生物技术，它是从应用目的出发，研究酶和应用酶的特异催化功能，并通过工程化过程将相应原料转化成所需产物的技术。酶工程技术在工业、农业、医药、食品等领域获得广泛应用。 酶工程的主要内容包括酶的生产、分离、纯化、酶的固定化、酶与固定化酶的反应器以及酶与固定化酶的应用等。 主要研究方向：（1）新酶的发现以及纯化；（2）酶和细胞的固定化技术与酶反应器；（3）基因工程与蛋白质工程技术在酶的分子设计与酶生产中的应用；（4）有机相中酶促反应的研究与应用；（5）酶的抑制剂，激活剂的开发与应用；（6）抗体酶与核酶的研究与应用；（7）模拟酶、合成酶及酶分子的人工设计、合成研究。 酶的性质与特性 酶的分类与命名 习惯命名法：根据底物命名或根据催化反应性质命名； 国际系统命名法及分类： 国际系统命名法：由底物及催化反应类型两部分组成，如：醇-NAD+氧化还原酶； 根据催化反应类型，将酶分成6大类（氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、连接酶），其下再分小类，并给每个酶一系统序号，如EC1.1.1.1,第一个数字1表明这是一种氧化还原酶、第二个数字1表明作用于分子中的羟基、第三个数字1表明作用的底物是乙醇、第四个数字1则是发现的顺序号。 酶的性质与特性 酶的结构与特性 根据酶的组成部分不同，可分为简单蛋白质和结合蛋白质两类。 酶是生物大分子，一般由数百个氨基酸组成。 酶催化反应具有以下特点：（1）专一性强；（2）催化效率高；（3）反应条件温和；（4）酶活性的调控机制复杂。 固定化酶及其特性 固定化酶的制备方法 包埋法：分为凝胶包埋法及微囊化包埋法两类。 吸附法：分为物理吸附法和离子吸附法。物理吸附法的载体有氧化铝、硅胶、纤维素等；离子吸附法常用载体DEAE-葡聚糖凝胶、 CM-纤维素等。 交联法：分为交联酶法、酶与辅助蛋白交联法、吸附交联法及载体交联法。 共价键结合法： 酶的固定化方法 酶的固定化方法及其特性的比较 固定化酶及其特性 固定化细胞的制备方法 将细胞限制或定位于特定空间位置的方法称为细胞固定化技术，被限制或定位于特定空间位置的细胞称为固定化细胞。细胞固定化技术是酶固定化技术的发展，因此固定化细胞也称为第二代固定化酶 细胞的固定化主要适用于胞内酶，要求底物和产物容易通过细胞膜。其中以包埋法应用最为广泛。 固定化酶的性质 酶活力的变化 酶固定化后活力大都下降，其原因可能是: (1)活性中心重要氨基酸与载体结合；（2）酶的空间结构变化；（3）酶与底物结合时产生空间位阻效应。 减少固定化工程中酶活力损失，反应条件要温和，此外，也可在固定化体系中加入抑制剂、底物或产物可保护酶的活性中心，如乳糖酶固定化时，在其抑制剂葡萄糖酸内酯存在下进行聚丙烯酰胺凝胶包埋，即可获得高活力固定化乳糖酶。 固定化酶的性质 酶的稳定性 固定化酶稳定性包括对温度、pH、蛋白酶、变性剂及抑制剂的耐受程度。 操作稳定性 ：用半衰期表示，通常半衰期达到1个月以上时，即具有工业应用价值。 贮藏稳定性： 热稳定性： 固定化酶生物反应器的主要类型 反应器的形式分类： 根据进料和出料方式：间歇式和连续式两大类； 连续式有两种基本形式：连续流动搅拌灌式反应器和填充床反应器； 衍生形式：连续流动搅拌灌-超滤膜反应器、循环反应器和硫化床反应 器等。 固定化酶反应器的主要类型 酶的固定化方法 返 回 酶的固定化方法及其特性的比较 返 回 返 回 固定化酶反应器的主要类型