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* 第四章 糖类提取工艺 本章重点 1、糖类的溶解性 2、糖类的性质鉴定 3、糖类的提取方法 4、糖类的分离 5、除蛋白质及脱色 6、多糖纯度检测及多糖含量的测定 第一节 概述 2、多糖的分类： 1、糖类的分类： 单糖：己糖、戊糖、己糖醛酸等 多糖：由10个以上的单糖聚合而成，根据组成可分为均多糖与杂多糖，结构上除单糖外还含有糖醛酸、去氧糖、氨基糖与糖醇等 低聚糖：一般由2~9个单糖聚合而成，如蔗糖、麦芽糖龙胆三糖等，大多由不同的单糖聚合而成，性质与单糖接近 （1）支持组织的多糖，一般不溶于水，浸在水中不膨胀，与化学试剂不易反应，如纤维素、木聚糖、甲壳素等 （2）营养性多糖，易吸水膨胀成胶体溶液，易与化学试剂反应，如淀粉、糖原等 （3）功能性多糖，具有生物活性，在水中具有一定的溶解能力，如香菇多糖、灵芝多糖、海带多糖等 3、多糖类药物的主要功能： 调节免疫、抗感染、促进细胞增值生长、抗辐射损伤、抗凝血、降血脂、抗动脉粥样硬化作用等 1、糖类的溶解性： （1）易溶于冷水和温乙醇：单糖、双糖、三糖和多元醇类 （2）易溶于冷水而不溶于乙醇：果胶和树胶 （3）易溶于温水、难溶于冷水、不溶于乙醇：黏液质，如木聚糖、菊糖、糖淀粉、糖元等 （4）难溶于冷水和热水、可溶于稀碱：包括水不溶胶类，总称半纤维素，如木聚糖、半乳聚糖、甘露聚糖等 （5）不溶于水和乙醇、部分溶于碱液：氧化纤维素类，可溶于氢氧化铜的氨溶液 （6）在以上溶剂中均不溶：纤维素 第二节 糖类提取工艺特性 活性多糖的溶解性：溶于水、稀醇，不容于高浓度乙醇及弱极性溶剂 2、糖类的鉴定： （1）苯酚-硫酸法 （2）蒽酮-硫酸法 （3）费林试剂反应 （4）成脎反应 3、糖类的提取方法： ①热水浸提 ②酸水浸提 ③碱水浸提 ④酶解水浸提 ⑤其它方法：超声波法、微波萃取 4、影响糖类提取的因素 原料、提取工艺、分离工艺 提取工艺：原料状态、提取液、料液比、温度、时间 注意事项：应抑制水解酶，尽可能采用新鲜材料并迅速干燥，沸醇和碳酸钙处理时易引起糖苷键的交换反应。 5、糖类的分离 ①水提醇沉淀法：先高浓度乙醇脱脂及游离色素，再水提，最后用乙醇沉淀 ②膜分离法：利用溶质分子大小不同进行分离 ③分级沉淀法：逐步增加乙醇浓度；有机溶剂分级沉淀；浓热液逐冷法；无机盐盐析法 ④活性炭柱层析法：用于低聚糖的分离 ⑤凝胶过滤法 ⑥离子交换层析法 ⑦季铵盐沉淀法：将CTAB顺次加入到pH值增加的多糖溶液中（含少量硫酸钠可促进沉淀） ⑧金属离子沉淀法 6、除蛋白质 （1）Sevag法 氯仿：戊醇为5：1或4：1，剧烈振摇20-30min，蛋白质变性成胶状，离心后处于氯仿和水层中， （2）三氟三氯乙烷法 氟里昂-113, 常温常压下为无色易挥发液体。化学性质稳定，对金属无腐蚀性。有醚味，沸点47.6℃。不易燃烧，几乎不溶于水，溶于醇、醚及大多数有机溶剂。为微毒物质，吸入后能引起眩晕、麻醉、恶心、呕吐等症状，但是，一旦脱离污染环境，呼吸新鲜空气或输氧，症状就会消失。 三氯乙烷：多糖溶液为1:1，低温搅拌10min，离心得上层水溶液，水层继续用上述方法处理几次。此法效率高，但溶剂沸点低，不宜大量使用。 （3）三氯乙酸法 低毒，溶于水、乙醇、乙醚 往多糖溶液加入三氯乙酸至溶液不再继续浑浊为止，在5~10℃放置过夜，离心去蛋白即可，可能引起某些多糖的降解 （4）酶法 胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、链蛋白酶等 *