6真菌感染与实验室诊断进展_ 李若瑜.pptVIP

真菌感染的分类—— 根据真菌侵犯人体的部位分为四类： 浅表真菌病 皮肤真菌病 皮下组织真菌病 系统性真菌病 临床常见的真菌病—— 浅部真菌病 限于皮肤最外层，甲板、毛发和粘膜的感染。 主要的感染是皮肤癣菌病和浅表念珠菌病。 大多轻微，容易诊断，对治疗反应良好。 手、足、甲癣—最常见的真菌病 各种头癣：传染、危害健康 皮下真菌病—往往经过外伤发病 系统性真菌病 常起源于肺，可以播散到全身许多器官。 常通过吸入致病菌孢子而获得，其致病菌腐生于土壤或腐败有机物中，或作为植物致病菌。 病原体可分为两组：真正的致病菌和条件致病菌。 系统性真菌病—危及生命 系统性真菌病主要的致病真菌 荚膜组织胞浆菌 粗球孢子菌 皮炎芽生菌 巴西副球孢子菌 临床常见的条件性真菌感染 念珠菌病: 最常见，血源感染的第4位。 曲霉菌病: 常见于干细胞移植、实体器官移植、大剂量化疗患者。 隐球菌病: 艾滋病人患病率为10-20%。 接合菌病（毛霉病）:多见于重症糖尿病、烧伤病及器官移植病人。 临床有增多趋势的条件性真菌 非白念念珠菌感染 毛孢子菌感染 地霉感染 镰刀菌感染 枝顶孢霉感染 暗色真菌感染 马尔尼菲青霉 真菌感染的诊断方法 真菌镜检 真菌培养 组织病理 生理生化 血清学方法 分子生物学 真菌感染的实验诊断方法及问题 显微镜检查-阳性率？ 培养-时间？敏感性？意义？ 血清学-敏感性？特异性？ 分子生物学-标准化？ 组织病理学 念珠菌病-直接镜检 隐球菌病—直接镜检 曲霉病—— 曲霉病——直接镜检 接合菌（毛霉）病—直接镜检 各种培养法— 病原真菌鉴定的基本流程 常见病原真菌 酵母及酵母样真菌 _念珠菌 _隐球菌 _毛孢子菌 _马拉色菌 念 珠 菌 属 简介 念珠菌大约有150个种，65%以上不能在37℃生长，无致病性 念珠菌属可以感染皮肤、粘膜及内脏器官引起念珠菌病 常见的致病性念珠菌 白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌、乳酒念珠菌 临床最常见的是白念珠菌 生物学特性 念珠菌在环境中和人体内均可寄生存在 正常人皮肤、口腔、肠道、肛门、阴道中可分离出本菌 显微镜下表现为芽孢和假菌丝 假菌丝一般与致病相关 寄生时一般表现为孢子相 致病性 条件致病菌 白念珠菌致病力强 念珠菌毒素、菌体形态、黏附性和分泌水解酶与其致病性密切相关 常见病原菌 白念珠菌（Candida albicans） 热带念珠菌（C.tropicalis） 克柔念珠菌（C.krusei） 近平滑念珠菌（C.parapsilosis) 光滑念珠菌 (C.glabrata) 乳酒念珠菌（C.kefyr） 季也蒙念珠菌（C.guilliermondii） 实验室检查 直接镜检：可见卵园形发芽孢子及菌丝，如查到大量假菌丝，说明念珠菌处于致病状态。 染色：革兰氏染色，菌丝、芽孢呈蓝色，着色不均匀。过碘酸染色，菌丝、芽孢染成红色。用1:1000吖啶橙染色，在荧光显微镜下，菌体呈现荧光。 培养：最常用的培养基是沙堡氏培基，当菌落生长后再移种至米粉吐温80培基或其它鉴定培养基中，以便进一步鉴定菌种。 念珠菌直接镜检（LPCB） 致病性酵母菌鉴定原则 鉴定目的：确定感染及传染源；选择敏感抗真菌药物； 哪些酵母菌需要鉴定到种： 所有分离自无菌体液，包括脑脊液、血液、尿液、穿刺液及其它体液的酵母菌； 分离自所有严重疾患或免疫受损病人或怀疑真菌感染的病人的酵母菌； 从任何临床标本中分离出大量的酵母菌； 分自若干连续取材的标本，除呼吸道分泌物，也应鉴定至种的水平； 芽管试验（Germ-tube test） 原理：白念珠菌在有营养的液体环境中35℃培养，可从酵母细胞生出芽管。 结果：白念珠菌可在2h内生成芽管，热带念珠菌和其他念珠菌则否。 厚膜孢子形成试验（Dalmo plate test） 念珠菌显色培养基CHROMagar Candida API—20C酵母鉴定系统 ID32C 酵母鉴定系统 VITEK全自动微生物鉴定仪 YBC酵母菌鉴定卡。 有30个孔的一次性塑料卡，包括26个常规生化反应和4个阴性质控。 利用YBC，只有21.3%的酵母需做补充生化试验或形态学检查。 白念珠菌 菌落特征 沙氏培养基25℃中等速度生长，形成酵母样菌落，奶油样、光滑、闪光，老后有皱褶 显色琼脂基上呈绿色菌落 显微镜特征 玉米粉吐温琼脂：真菌丝和假菌丝，多数假菌丝，假菌丝连接处产生多数呈簇状、葡萄状小分生孢子，顶端或侧支产生厚壁孢子 血清芽管试验，在37℃1-3小时后，可以产生芽管 白念珠菌(Candida albicans) 酵母菌鉴定程序和路线 血清学试验-菌种鉴定 抗原型别：