选修3：动物细胞融合和单克隆抗体我要用.ppt

学习目标 了解动物细胞融合的原理、过程和意义。 理解单克隆抗体制备的过程和应用 学习重点难点 学习重点： 单克隆抗体的制备和应用 学习难点： 单克隆抗体的制备过程 植物体细胞杂交过程： 活动4：请同学们仔细阅读P53-P54单克隆抗体的制备过程，完成导学案P5第4题。 任务：阅读教材52页，完成下列问题限时5分钟 1.动物细胞融合的概念 2.动物细胞融合的结果 3.动物细胞融合的原理 4.诱导动物细胞融合的方法 ① 例5、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期效果吗？　 　。原因是　　　　 ____________________________________________________________。（2）图中②为　　 　过程，常用　　　 　作为诱导剂。该细胞继承了_____________________　 　，因此不仅能分泌　　___________，还有　　 　　本领。 不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法 获得产生专一抗体的B淋巴细胞 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 大量增殖 制备单克隆抗体 （3）该方案的目的是_________________________。 植物体细胞杂交示意图 动物细胞融合过程示意图 3、整个制备过程为何要经过两次筛选? （第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种），第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。） 思考： 1、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体 * 番茄-马铃薯（理想图） 有梦想，才会有创造！ 如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗？ 动物细胞也能融合吗？xuekewang 动物细胞工程 通常采用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 动物细胞核移植 是其他动物细胞工程技术的基础。 选修3：专题2 细胞工程 第二节 动物细胞工程 植物细胞A 植物细胞B 去除细胞壁 去除细胞壁 原生质体A 原生质体B 诱导融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂（脱分化） 分化发育（再分化） 愈伤组织 杂种植株 原生质体的制备 原生质体的融合 筛选 组织培养 1、如果让动物细胞进行融合/杂交，应注意动、植物之间的哪些区别？ 无细胞壁 全能性受限制，不能发育成杂种动物 2、请设计动物细胞融合的流程。 动物细胞融合与植物细胞杂交的不同： 无需去除细胞壁 不能培养成新的动物个体 动物细胞融合过程 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 1、为什么可以用灭活的病毒？ 2、病毒不灭活可以吗？ 不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 一、动物细胞融合（细胞杂交） （P52） 1.概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2.结果： 形成单核杂交细胞 3.融合原理： 细胞膜的流动性 4.诱导方式 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 5.意义： 突破有性杂交局限，使远缘杂交成为可能 广泛应用多个领域 重要用途：制备单克隆抗体 融合完成的标志？ 1.4 比较植物体细胞杂交和动物细胞融合 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原 理 融合前处理 诱 导 方 法 用 途 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、 果胶酶去壁 用胰蛋白酶 使细胞分散 物理、化学方法 物理、化学、 灭活的病毒 获完整植株 主要用于制备 单克隆抗体 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点： 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 产量低 纯度低 特异性差 灵敏度低 1975年的实验室 一个美丽的发现 每个B淋巴细胞——只能分泌一种特异性抗体 怎样大量获得单一抗体 进行无性繁殖（克隆） 体外培