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- 2018-05-27 发布于江西
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《乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒( 型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光法)操作规程》.doc
《乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(1+2型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光法)操作规程》
苏州华益美核酸实验室 文件编号:HYM/C-525-JY 版本号:1/A 实施时间:2012年04月01日 乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(1+2型)核酸检测
试剂盒(PCR-荧光法)操作规程
1.目的
规范核酸检测试验操作,确保检测结果的准确性。
2.原理
2.1 汇集:吸取8份(或以下)样品到指定的汇集管。
2.2提取:病毒核酸提取的方法为磁珠法。试剂盒提供之内对照(IC)为不具感染性的假病毒,在进行样品核酸提取前加入样品中,监控提取、扩增和分析的全过程。标本经裂解液处理后会将病毒外鞘膜破坏,蛋白质变形,使病毒裂解释放出病毒基因组核酸。加入表面包被有二氧化硅的磁珠颗粒,在高盐环境下带负电荷的核酸吸附到带正电荷的的磁珠颗粒表面。洗液可以洗去未结合的物质,如变性的蛋白、细胞碎片、PCR抑制物等并降低盐浓度。纯化的病毒在特定的环境下从磁珠颗粒表面洗脱下来成为扩增的模板。
2.3 扩增:采用PCR扩增TaqMan荧
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