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- 2018-05-27 发布于贵州
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ster 特点: 体积小 繁殖力强 世代周期短 容易饲养 染色体数目少,巨大的唾腺染色体 突变体多,P-element,…… 遗传背景清楚(基因组测序完成) 一、野生果蝇采集与生活史观察 野生果蝇采集: 取洁净敞口容器,放入适量果皮(葡萄皮最佳,取皮前用清水稍稍冲洗),置户外阴凉处数天,见有小小的金黄色虫子(果蝇)在其内飞翔,即可用透气的材料覆盖容器口。采集完成 观察作业: 写出详细的果蝇生活史观察日记 二、黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的雌雄鉴别和突变体观察 Fem Mal 体形 腹部条纹数 尾端形状 尾端条纹 外生殖器形状 性梳 黑腹果蝇突变体观察 性状分类 名称及代号 表型特征 基因所在染色体 体色 黑檀体(ebony) e 体乌木色 Ⅲ 灰体/野生型 + 体灰色/金黄色 Ⅲ 翅形 短翅(miniature)m 双翅短小与尾端等长 Ⅹ 长翅/野生型 + 双翅长过尾端 Ⅹ 残翅(vestigial) vg 翅极小,仅残迹 Ⅱ 眼色 白眼(white) w 复眼白色 Ⅹ 红眼/野生型 + 复眼红色 Ⅹ 刚毛形状 焦刚毛, sn3 刚毛弯曲烧焦状 Ⅹ 直刚毛/野生型 + 刚毛尖直 Ⅹ 黑檀体(e)突变体 三隐性(w m sn3)突变体 果蝇突变体观察 三、黑腹果蝇的饲养及管理 1、黑腹果蝇的“培养基”配置 果蝇以酵母菌为食。凡能培养酵母菌的基质,都可用作果蝇的“培养基” 。常用的有玉米粉培养基、米粉培养基、香蕉培养基等。配方如下页表: (1)果蝇培养基的几种配方 玉米粉饲料 米粉饲料 香蕉饲料 水(ml) 200 100 50 琼脂(g) 2 2 1.6 食糖(g) 13 10 ― 香蕉浆(g) ― ― 50 玉米粉(g) 17 ― ― 米粉(g) ― 8 ― 麸皮(g) ― 8 ― 丙酸(ml) 1 1 0.5-1 酵母粉(g) 适量 适量 适量 (2)玉米粉培养基配置方法 i)取应加水量的一半,加入琼脂,煮沸,使充分溶解,再加糖,煮沸溶解; ii)取另一半水混和玉米粉,加热,调成糊状; iii)将上述两者充分混匀,煮沸(以上操作都要搅拌,以免沉积物烧焦) ; iv)将所得培养基分装入指形管或培养瓶(厚度2 cm),勿沾染管口/瓶口. 加塞、包扎,高压灭菌。 Ⅴ)稍冷后取出,直立、冷却。在洁净空间打开瓶塞,用酒精棉球擦干管壁/瓶壁上的冷凝水滴,加入适量丙酸及酵母粉,即可投入果蝇进行饲养。 2、果蝇的麻醉处理 对果蝇的观察与检查,均在其麻醉昏迷状态进行。 1)将果蝇转移到洁净干燥的麻醉瓶中。向麻醉瓶的棉塞底部滴加乙醚2~3滴,迅速塞上棉塞。待果蝇全部麻醉昏迷后,即倒出至白瓷板/白纸上进行观察。 2)果蝇的麻醉程度视实验要求而定:对仍需培养的果蝇,以轻度麻醉、不使死亡(翅膀外展45? )为宜。迅速将选定的果蝇移入侧翻的培养瓶中,待其自然苏醒后,再将瓶扶正。 3)检查完毕,应将不再需要的果蝇倒入死蝇收集瓶中。 四、果蝇的杂交与管理 为确保杂交彻底,雌蝇必须选用处女蝇。 雌蝇羽化后的8小时内,尚未充分成熟,不会交配。此时收集的雌蝇是处女蝇。 1、处女蝇的收集 每隔6-8小时,选雌蝇 根据黑色消化道识别 根据蛹,不具性梳的个体 处女蝇可以隔离培养一周 2、其他相关操作 杂交时把所需品系的雄蝇直接放到处女蝇培养瓶中(共5对),贴上标签,注明两亲本的基因型及交配日期。 7~8天后清空亲本,待F1成蝇羽化后逐日观察、计数对应表型个体数(可靠的计数及观察是培养开始的20天以内,再晚可能有F2了)。 若须继续实验、观察F2,可从F1内挑出雌雄蝇5-10对另瓶培养。 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster) 的伴性与非伴性、连锁与 非连锁遗传分析 目的:通过一个杂交实验(历时一个月)同时进行: 一对等位基因分离分析 两对非等位基因自由组合分析两对非等位基因连锁交换分析 基因伴性遗传分析 三点测交与基因定位分析 ? 果蝇杂交实验的综合实验设计 如何在给定的果蝇突变类型中完成上述实验?关键是哪一步? 怎样选择……? 示范:果蝇麻醉、观察示范及注意事项; 果蝇杂交操作及注意事项 要求: 各组自行繁殖本组实验所需的杂交亲本; 注意处女蝇的搜集; 将果
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