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几种化学物质对蟾蜍蝌蚪生存及生长发育影响 　　摘　要：在室内条件下，采用单因子急性和慢性毒性实验法，分别研究了水环境中的pH、洗涤剂、除草剂、重金属离子(Pb2+、Cu2+、Hg+)对黑眶蟾蜍蝌蚪的毒性效应。结果表明，这些水体污染物不但对蝌蚪的生存造成危害，还对蝌蚪的红细胞有致畸作用；而其慢性毒害表现为蝌蚪身体畸形，肤色变浅，生长发育迟缓等．据此，可以利用黑眶蟾蜍蝌蚪对水污染进行监测。 　　关键词：化学物质；生长发育；蝌蚪；黑眶蟾蜍 　　中图分类号：Q959．7 　　文献标识码：A 　　文章编号：l007-7847(2006)02-0156-06 　　水体污染对水生生物造成极大的危害。消除或减轻污染，关键问题在于对环境进行有效的监测。两栖动物具有水陆两栖独特的生活周期，依赖水环境而生存，所以水体的质量将会对蝌蚪的生长发育产生巨大的影响，通过观察蝌蚪的形态行为特征，可以对水体进行质量评价。蝌蚪是两栖动物变态前的幼体阶段，因其细胞分裂旺盛，对环境的变化极为敏感，因此是监测环境的适宜指示物种。 　　国外学者较早利用蛙类及蝌蚪对农药污染进行监测。美国在1989年就明确提出将两栖动物作为环境质量监测的指示生物。国内此类研究起步较晚，直到20世纪90年代初才见报道，并且已有的研究主要是对水体中的某一重金属及除草剂等有害物质的监测，贺维顺等用国产洗衣粉进行了对蝌蚪红细胞微核率影响的致突变研究，发现其有一定的剂量效应关系，且能诱发染色体损伤，而对水体的酸碱度的监测报道则很少。 　　本文报道了不同pH的水体、不同浓度的除草剂、洗涤剂以及重金属溶液对黑眶蟾蜍蝌蚪的存活与生长发育的情况以及对红细胞微核产生的影响，从宏观和微观不同层次上综合分析污染危害程度，为环境评价，污染预报和污染物危险性提供依据，也为保护两栖类和其它水生动物以及探寻更为有效的环境生物学监测方法提供科学依据。 　　 　　1　材料与方法 　　 　　1．1 实验材料 　　春季在华南师范大学生物试验场捕捉成熟的雌雄黑眶蟾蜍(aufo melanostictus Schneider)，将其放于孵化池中产卵，以蝌蚪作为实验材料。蝌蚪喂以混合性饲料(含面粉，鱼??，大豆粉，维生素等)，每日早晚各一次。 　　1．2 试剂仪器 　　0．1 mol／LH2S04，0．1 mol／LNaOH，市售高效无磷洗衣粉(汰渍，广州宝洁公司；立白，广州立白公司)，洗洁精(立白，广州立白公司)，稻草隆(18％乙?苄?甲可湿性粉剂，有效成分：bensul-furonmethyl，acetochlor，metsulfuronmethyl，浙江天丰化学有限公司)，乙酸铅，硫酸铜，硝酸汞，甲醇，Alsver液，Giemsa染液，磷酸缓冲液(pH＝6．8)，50μmol／LMgS04和Ca(N03)：溶液。 　　常规实验器皿，pH计，解剖镜，显微镜，数码相机等。 　　1．3 方法 　　1．3．1 蝌蚪急性染毒实验 　　观察各水体化学物质对蝌蚪的作用，记录各实验组中蝌蚪开始死亡和全部死亡的时间，得出蝌蚪可存活的水体的pH值及洗衣粉、洗洁精、稻草隆、乙酸铅、硫酸铜、硝酸汞的浓度范围。每组放人出膜7d、大小相当的蝌蚪30―50尾，每24h换液1次，各组设对照1个。为统计准确，每实验组和对照组平行设置3个重复实验系列。所有实验组浓度梯度的设置原则依据前人实验和预实验得到的致死浓度而定。 　　1．3．1．1 pH染毒实验 　　用0．1 mol／L H2S04和0．1 mol／L NaOH来调节含有50μmol／LMgS04和Ca(N03)2母液水体(自来水作为溶剂)的酸碱度，设置各组pH值分别为3．0、3．5、3．8、4．0、5．0、10．0、10．5、11．0． 　　1．3．1．2 洗涤剂染毒实验 　　把洗衣粉，洗洁精的母液(1g／L)用自来水来进行稀释，得到洗衣粉浓度分别为55、50、45、40mg／L；洗洁精浓度分别为70、65、55、50mg／L。 　　1．3．1．3 除草剂染毒实验 　　设置浓度为10、14、18、20 mg／L的稻草隆溶液。 　　1．3．1．4 重金属离子染毒实验 　　将乙酸铅、硫酸铜、硝酸汞溶解配成1000mg／L的母液，取母液稀释成不同的浓度组(乙酸铅4、8、12、20、32mg／L；硫酸铜0．005、0．01、0．02、0．04、0．08 mg／L；石肖酸汞0．01、0．02、0．04、0．08、0．12 mg／L)。 　　1．3．2 蝌蚪慢性染毒实验 　　根据急性染毒实验得出蝌蚪可存活的水体pH值、洗涤剂、除草剂以及重金属离子浓度范围，按浓度梯度设置不同pH值、不同洗涤剂、除草剂以及重金属离子浓度组别的水体，同时各设对照组1个，每实验组放